病原体核酸快速检测临床实验室规范化应用专家共识（2025版）解读.docxVIP

病原体核酸快速检测临床实验室规范化应用专家共识（2025版）解读

一、共识制定背景与核心定位

（一）制定背景

近年来，全球感染性疾病防控形势日趋复杂，新发突发传染病频发与传统病原体耐药问题交织，对临床病原学诊断的时效性、精准性提出了前所未有的高要求。病原体核酸快速检测技术凭借其高灵敏度、高特异性、短检测周期的技术优势，已从突发公共卫生事件应急检测逐步走向常规临床应用，成为感染性疾病早期诊断、精准治疗及疫情防控的核心技术支撑。

然而，随着技术的快速迭代与应用场景的不断拓展，临床实践中逐渐暴露出一系列亟待规范的问题：不同实验室在技术选型、操作流程、质量控制等方面存在显著差异；部分基层实验室缺乏标准化的操作规范，导致检测结果准确性参差不齐；新型检测技术（如宏基因组测序mNGS）的临床应用边界模糊，存在过度检测或解读不当的现象；生物安全防护与实验室管理未能完全适配检测技术的发展需求等。这些问题不仅影响了检测结果的可靠性与临床应用价值，也给医疗质量安全与公共卫生防控带来潜在风险。

为回应临床实践需求，整合国内外最新研究证据与技术进展，规范病原体核酸快速检测的临床实验室应用，由全国临床检验、感染病学、微生物学、生物安全等多领域专家联合发起，经过多轮调研、论证与修订，最终形成《病原体核酸快速检测临床实验室规范化应用专家共识（2025版）》（以下简称《2025共识》）。该共识在2019版基础上，重点吸纳了近五年的技术创新成果与临床实践经验，针对当前应用中的突出问题提出系统性解决方案，为各级医疗机构实验室提供全面、可操作的规范化指引。

（二）核心定位

《2025共识》的核心定位是技术规范与临床应用的桥梁，旨在实现三大目标：一是统一技术标准，明确核酸快速检测各环节的操作规范与质量要求，保障检测结果的准确性与可比性；二是厘清应用边界，界定不同检测技术的适用场景与临床价值，引导精准检测与合理应用；三是强化安全管理，建立全流程生物安全防护体系，防范实验室感染风险。

共识适用于所有开展病原体核酸快速检测的临床实验室，包括各级医疗机构检验科、独立医学检验实验室、疾病预防控制机构实验室等，覆盖细菌、病毒、真菌、支原体、衣原体、寄生虫等各类病原体的核酸快速检测项目，为实验室建设、技术应用、质量控制、结果解读等提供全方位指导。

二、病原体核酸快速检测技术分类与性能评价标准

（一）技术分类及原理

《202原理

《2025共识》基于技术原理与应用场景，将病原体核酸快速检测技术分为四大类，明确了各类技术的核心特征与适用范围：

1.?核酸扩增类技术：作为目前临床应用最广泛的技术类型，核心原理是通过酶促反应实现靶标核酸的特异性扩增，再通过信号检测判断结果。包括实时荧光定量PCR（qPCR）、恒温扩增技术（如环介导等温扩增LAMP、重组酶聚合酶扩增RPA）、数字PCR（dPCR）等亚型。其中，qPCR技术因其成熟稳定、成本可控，仍是临床常规检测的首选；恒温扩增技术无需复杂热循环设备，检测周期可缩短至30分钟内，适用于床旁检测（POCT）与基层医疗机构；dPCR则凭借单分子级别的检测灵敏度，在低载量病原体检测、病毒载量精准定量等场景中具有独特优势。

2.?基因测序类技术：以高通量测序为核心，分为靶向测序与宏基因组测序（mNGS）。靶向测序针对特定病原体或基因片段设计探针，可实现多病原体同时检测，如呼吸道6项病原体联合检测（涵盖甲乙流、呼吸道合胞病毒、腺病毒等）；mNGS技术无需预设靶标，可对样本中所有核酸进行全面测序，通过数据库比对识别病毒、细菌、真菌、寄生虫等各类病原体，是新发突发传染病与未知病原体鉴定的关键技术，在重症感染诊断中发挥着不可代的作用。

3.?核酸杂交类技术：基于核酸分子互补配对原理，通过标记探针与靶标核酸结合实现特异性检测，包括核酸原位杂交、膜杂交等。该类技术操作相对简便，但灵敏度低于扩增类技术，目前主要用于特定病原体的辅助诊断与分型检测。

4.?新型检测技术：包括CRISPR检测技术、生物传感器检测技术等。CRISPR技术利用核酸酶的特异性识别功能，结合信号放大系统，兼具高特异性与快速检测优势，检测时间可缩短至20分钟内；生物传感器技术则通过生物识别元件与信号转换装置的结合，实现核酸的快速定量检测，适用于即时检测场景。

（二）性能评价标准

《2025共识》首次明确了核酸快速检测技术的统一性能评价指标体系，要求实验室在引入新技术或新试剂时，必须完成以下核心指标的验证：

1.?灵敏度：定义为在设定的置信水平下，检测方法能够检出的最低病原体核酸浓度，以拷贝数/mL或IU/mL表示。不同应用场景对灵敏度要求不同：常规临床诊断需≥100拷贝/mL，重症感染与低载量检测需≥10拷贝/mL，mNGS技术需