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用于结构研究的化学方法1．高碘酸氧化高碘酸可以选择性地断裂糖分子中连二羟基或连三羟基处，生成相应的多糖醛、甲醛或甲酸。反应定量地进行，每开裂一个C－C键消耗一分子高碘酸。通过测定高碘酸消耗量及甲酸的释放量，可以判断糖苷键的位置、直链多糖的聚合度、支链多糖的分枝数目等。以葡聚糖为例，以1?2或1?4位键合的糖基经高碘酸氧化，平均每个糖基仅消耗一分子高碘酸，并且无甲酸释放；以1?3位键合的糖基不被高碘酸氧化；以l?6位键合的糖基或非还原末端基经高碘酸氧化，消耗二分子高碘酸，同时释放一分子甲酸。如香菇多糖(Lentinan)经高碘酸氧化，平均每个葡萄糖基消耗0.57mol的高碘酸，同时产生0.22mol的甲酸(相对高碘酸消耗量，结果偏低)，证明分子中一定存在连三羟基。由高碘酸消耗值(0.57)，亦可以推算出l?3与1?6键(或分枝末端基)之比为5:2。当然还要配合Smith降解与甲基化试验才可做最后结论。2．Smith降解Smith降解是将高碘酸氧化产物还原后进行酸水解或部分酸水解。由于糖基之间以不同的位置缩合，用高碘酸氧化后则生成不同的产物。将氧化产物用硼氢化合物(如硼氢化钾或硼氢化钠)还原成稳定的多羟基化合物，经酸水解后用纸层析或气相层析鉴定水解产物，由降解的产物可以推断糖苷键的位置。以葡聚糖为例：非还原末端基的降解产物亦为甘油。由于在实验中需加入乙二醇以破坏剩余的高碘酸，终产物中检测乙二醇就没有意义了。一般以甘油、赤藓醇和葡萄糖(或其他糖)作为这几种糖苷键的特征终产物。虽然以1?2位、以1?6结合的糖基或分枝末端基经Smith降解都有甘油产生，但以l?2位结合的糖基经高碘酸氧化不产生甲酸，可借以区别。亦可以对高碘酸氧化的产物还原后进行缓和的部分酸水解，仅仅断裂乙缩醛键，获得末被高碘酸氧化破坏的多糖或寡糖片段。3．甲基化反应(硫酸二甲酯法)在浓碱溶液中，硫酸二甲酯是甲基糖苷的良好甲基化试剂。它首先由Denham和Woodhouse用于纤维素的甲基化，随后Haworth证明此法对简单糖类及糖苷类都能适用，从而被广泛地使用。反应方程式为：此法的优点是试剂便宜、操作简便，而且以水作为溶剂，大多数糖类易于溶解。缺点是甲基化不易完全，如要得到全甲基化的产物，往往需要反复多次反应才能完成。这种一次反应不完全的特点恰可被利用来制备部分甲基化糖，所得混合物经适当分离纯化即可得到多种或甲基数目不同、或甲基位置不同的部分甲基化糖。此法以甲基糖苷作原料最为适宜，但在严格控制反应温度的情况下，还原性的糖也可以直接用作原料，只是产率偏低。4.多糖中乙酰基的定位乙酰基在多糖中广泛存在，它的有无及其位置往往影响多糖的理化性质和生物活性。这里介绍deBelder和Norrman有关乙酰基的定位方法。此法的基本原理是：利用甲基乙烯醚将多糖结构上的游离羟基保护起来，脱去乙酰基，使结合的羟基游离。对游离羟基进行甲基化，去除保护基团并完全水解后，检测水解单糖衍生物，其甲基的位置即是原始多糖中乙酰基的位置。反应式为：多糖多糖是由多个单糖分子缩合、失水而成的。按其功能而言，某些不溶性多糖，如植物的纤维素和动物的几丁质（即壳多糖），可构成植物和动物的骨架原料；另一些作为储存形式的多糖，如淀粉和糖原等，在需要时，可以通过生物体内酶系统的作用，分解、释出单糖；还有许多多糖，如粘多糖、血型物质等，具有更复杂的生理功能，在动物、植物和微生物中起着重要的作用。多糖可以由一种单糖缩合而成，称为均一多糖；也可以由不同类型的单糖缩合而成，称为不均一多糖。任何具有重要机械性能的多糖都是由己糖（六碳糖）构成的。其中最常见和最可能的构象是4C1椅式构象，因为其内能最低，而环上伸出的各官能团间相互作用也最小。?型糖中的1号碳原子所连OH在环平面之上，而?型糖则相反。氨基酸只通过肽键连接，其立体构象是非常稳定的；而单糖则可通过分子上任意的羟基缩聚成键，因此糖单元互相连接的方式比氨基酸的多许多。如在吡喃糖（六元环的半缩醛）中有5个可反应点，其中每一个都能以?型或?型出现，因此共有10种位置，100种方式可使两个吡喃糖结合成二糖。但糖单体的组装过程一定是受严格控制。纤维二糖是纤维素的降解产物，其两个?-D-缩葡萄糖单元由?-1,4键连接。连接两糖单元之间键的两端可以自由旋转，两个角分别称为?和?（和肽键类似）。单糖之间的连接由于氢键而得到加强。氢键可能存在于任意的H和O之间，而在蛋白质中氢键的形成受到更多的限制，因此多糖比蛋白质具有更多的稳定构象。下图给出了在?-1,4键接方式中通常出现的氢键。显然，这种结构在晶体中更为稳定。因为在含水性环境中水分子会与糖竞争形成氢键的位置，而糖中氢键的削弱会使相邻单元间旋转加强．导致出现成任意卷曲的构型。另外，也有在溶液中稳