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tRNA在识别密码子上的作用1.tRNA的接头作用tRNA分子上与多肽合成的有关位点至少有四个：3’端－CCA上的氨基酸接受位点；识别氨酰-tRNA合成酶的位点；核糖体识别位点；反密码子位点。tRNA在识别mRNA分子上的密码子时，具有接头作用。氨基酸一旦与tRNA形成氨酰-tRNA后，进一步的去向就由tRNA来决定。tRNA凭借自身的反密码子与mRNA分子上的密码子相识别而把所带的氨基酸送到肽链的一定位置。密码子与反密码子之间的识别将放射性同位素标记的半胱氨酸在半胱氨酸-tRNA合成酶催化下与tRNACys形成半胱氨酰-tRNACys。然后用活性镍作催化剂，使半胱氨酸转变为丙氨酸，形成丙氨酰-tRNACys。然后将它放到网织红细胞无细胞体系中进行蛋白质合成，分析后，发现丙氨酸插入了本应由半胱氨酸所占的位置。这就证明了tRNA具有接头作用。2.tRNA分子的突变与校正基因遗传学家早就发现了回复突变现象。回复突变的原因很多，其中一种是由于在基因上发生的一个突变引起的，这称为基因间校正突变。随着对tRNA的结构功能有了较深入的了解，其本质已被逐渐揭开。大多数校正突变是发生在tRNA基因的突变上，从而使tRNA的反密码子在阅读mRNA的信息时发生了变化。H3NGlnCOO–COO–TyrH3NH3NCOO–GAG(Gln)到UAG（终止）的突变第二个突变使tRNATyr可以将UAG（终止）读作Tyr有活力的多肽无活力的多肽有活力的突变体多肽基因间校正突变图解从上图可以看出，某基因中部发生点突变而出现了一个额外的终止密码子UAG，于是多肽的合成在中途终止，产物失去生物活性（生物学意义），所以这种突变被称为无意义突变。对酪氨酸专一的tRNATyr上的反密码子应为3’-AUG-5’，但是如果此tRNA的基因发生突变，使反密码子变成3’-AUC-5’，它就可以将mRNA上的终止信号UAG读成酪氨酸，从而使多肽的合成得以继续。所合成的多肽中只有在酪氨酸处发生突变，这样的多肽突变体常具有部分或全部活力。通常，当某种tRNA突变分子出现时，也必定有可以识别正常氨基酸的tRNA存在。例如。tRNATyr的突变分子可识别终止信号，但同时也必定有可以正常识别UAC，UAU酪氨酸密码子的tRNATyr分子存在，这样就可以使转译维持正常。3’－A－U－C－5’5’－U－A－G－3’???tRNATyr突变分子的碱基（正常情况下应为3’AUG5’）此终止密码子被读作Tyr密码子反密码子大肠杆菌中肽链合成起始A.起始密码子（起始信号）细菌中多肽的合成并不是从mRNA5’-端的第一个核苷酸开始的。被转译的头一个密码子往往是位于5’-端的第25个核苷酸以后。同时应该指出，许多原核生物的mRNA往往是多顺反子mRNA，在同一mRNA分子上可编码好几种多肽链。如大肠杆菌中一个7000核苷酸长的mRNA可以编码5种与色氨酸合成有关的酶类。在转译时，各种酶蛋白都有自己的起始与终止密码子分别控制其合成的起始与终止。mRNA上起始区的富嘌呤区与16SrRNA3‘-末端之间的互补区域mRNA上的起始密码子常为AUG，少数情况下也为GUG。对起始密码子附近的核苷酸序列进行分析后发现，在距起始密码子上游约10个核苷酸的地方往往有一段富含嘌呤的序列（称为Shine-Dalgarno序列），它与16SrRNA3’-端的核苷酸序列形成互补。B.70S起始复合物的形成起始氨基酸及起始tRNA原核细胞中多肽的合成都自甲硫氨酸开始，但并不是以甲硫氨酰-tRNA作起始物，而是以N-甲酰甲硫氨酰-tRNA（缩写成fMet-tRNAf）的形式起始。70S起始复合物的形成mRNA首先与核糖体的30S亚基相结合，此反应必须有起始因子3(IF3，分子量21000的蛋白质)参加，以形成mRNA-30S-IF3复合物(1:1:1)，然后在IF1(分子量为8000的蛋白质)参与下，mRNA-30S-IF3进一步与N-甲酰甲硫氨酰-tRNA（fMet-tRNAf）、GTP结合，并释放出IF3，形成了一个30S起始复合物：30S核糖体-mRNA-fMet-tRNAf。30S起始复合物再与50S亚基结合，形成一个有生物学功能的70S起始复合物，同时GTP水解成GDP和Pi，IF1和IF2被释放出。这时，fMet-tRNAf占据了核糖体上的肽酰位点（P位点），空着的氨酰-tRNA位点（A位点）准备接受另一个氨酰tRNA，为肽链延伸作好了准备。在70S起始复合物中，tRNAf上的反密码子一定要与mRNA上的起始密码子AUG（GUG）配对，以保证读码的准确无误。大肠杆菌70S起始复合物的