观察人血永久涂片实验报告.docxVIP

观察人血永久涂片实验报告

一、实验目的

本实验旨在通过光学显微镜观察人血永久涂片，达到以下目的：首先，直观认识人体血液中各类血细胞的形态结构特征，包括红细胞、白细胞（中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞）及血小板；其次，学习并掌握识别各类血细胞的基本方法和要点；再次，理解各类血细胞在血液中的正常形态与功能之间的联系，为后续生理学及病理学相关知识的学习奠定基础。

二、实验原理

血液作为一种重要的结缔组织，由血浆和悬浮于其中的血细胞组成。人血永久涂片是将新鲜血液经过涂片、固定、染色（通常采用瑞氏染色法或瑞氏-吉姆萨复合染色法）等一系列处理后制成的可长期保存的标本。瑞氏染色法利用了不同血细胞内各种物质对酸性染料（伊红）和碱性染料（美蓝）的亲和力差异，使各类血细胞呈现出特定的颜色反应和形态特征，从而便于在光学显微镜下观察和区分。例如，红细胞因富含血红蛋白，易与伊红结合而呈淡红色；细胞核等嗜碱性物质则与美蓝结合呈深蓝色；而嗜酸性颗粒则与伊红有较强亲和力，呈鲜红色。

三、实验材料与试剂

实验所使用的材料与试剂主要包括：人血永久涂片标本（由专业机构或教师提供）、香柏油（用于油镜观察）、二甲苯（用于清洁镜头，操作时需注意通风）。

四、实验仪器与设备

实验过程中需用到的主要仪器与设备如下：光学显微镜、擦镜纸、载玻片盒（用于存放标本）。

五、实验步骤

1.标本准备与显微镜调试：首先，从标本盒中取出制备完好的人血永久涂片，注意手持载玻片的两端，避免手指接触涂片区域，以防污染或损坏。将涂片小心地放置在显微镜的载物台上，用压片夹固定，确保涂片的观察面朝上，且观察区域位于通光孔中央。

2.低倍镜观察：转动粗准焦螺旋，使载物台缓慢下降（或镜筒上升，根据显微镜类型而定），同时打开光源，调节光圈和反光镜（或亮度调节旋钮），使视野亮度适宜且均匀。然后，双眼睁开，从目镜观察，转动粗准焦螺旋使载物台缓慢上升（或镜筒下降），直至视野中出现模糊的物像，再调节细准焦螺旋，使物像清晰。在此过程中，移动载玻片，寻找细胞分布均匀、无重叠、染色效果良好的观察区域。通常，红细胞在低倍镜下呈密集分布的淡红色小点状。

3.高倍镜观察：在低倍镜下选定理想的观察区域后，将该区域移至视野中央。然后，转动转换器，换用高倍物镜。此时，视野亮度可能会变暗，需重新调节光圈或光源亮度。一般情况下，只需略微调节细准焦螺旋即可获得清晰的物像，切勿使用粗准焦螺旋，以免压碎玻片或损坏镜头。在高倍镜下，可以更清晰地观察到红细胞的形态，以及体积较大、数量较少的白细胞轮廓。仔细寻找白细胞，注意其细胞核的大致形态和胞质的染色情况。

4.油镜观察：如需更细致地观察白细胞的核形、胞质颗粒及血小板的形态，则需使用油镜。在高倍镜下将目标白细胞移至视野中央，然后转动转换器，使高倍物镜离开通光孔，在载玻片的观察区域中央滴加一滴香柏油。接着，小心转动转换器，使油镜镜头浸入香柏油中，确保镜头与油滴充分接触，但避免用力过猛。通过目镜观察，缓慢调节细准焦螺旋，直至物像清晰。观察完毕后，先转动粗准焦螺旋使载物台下降（或镜筒上升），然后转动转换器，将油镜移开，用擦镜纸蘸取少量二甲苯轻轻擦拭油镜头上的香柏油，再用干净的擦镜纸擦拭干净。载玻片上的香柏油也可用擦镜纸蘸二甲苯擦去（若为一次性标本则无需此步）。

5.绘图与记录：在观察过程中，选择具有代表性的视野，详细记录所观察到的各类血细胞的形态特点、颜色、相对大小及数量。如有条件，可进行绘图或拍照记录，并标注各主要血细胞类型及其结构。

六、实验结果与观察记录

通过显微镜观察，本次实验所用人血永久涂片染色效果良好，细胞形态清晰，分布较为均匀。

1.红细胞（Erythrocyte）：在显微镜下，红细胞通常呈现为淡红色、圆形或略带椭圆形的无核细胞，直径约为7-8微米（此为常识性描述，非实测）。其形态特点为双凹圆盘状，中央较薄，染色较浅，周边较厚，染色较深，这使得红细胞在视野中呈现出中央淡染的特征。红细胞数量众多，在视野中占据绝大多数，彼此之间排列紧密但不重叠（选择良好区域）。它们的形态较为一致，大小较为均一。

2.白细胞（Leukocyte）：白细胞数量相对红细胞少得多，体积也较大。在涂片上，白细胞根据其胞质内有无特殊颗粒，可分为粒细胞和无粒细胞两大类。在本次观察中，主要识别到以下几种白细胞：

*中性粒细胞（Neutrophil）：是白细胞中数量最多的一种。细胞呈球形，直径略大于红细胞。细胞核染色较深，呈杆状或分叶状（2-5叶多见），叶间有染色质丝相连，故又称多形核白细胞。胞质呈淡粉红色，内含有许多细小的、分布均匀的淡紫色或淡红色颗粒（中性颗粒）。

*淋巴细胞（Lymphocyte）：数量仅次于中性粒细胞。大小差异较大，小淋巴细胞与红细胞直径