团体标准 中华鳖腮腺炎诊断方法.docxVIP

团体标准中华鳖腮腺炎诊断方法

1范围

本文件规定了中华鳖（Pelodiscussinensis）腮腺炎的术语和定义、诊断原则、临床症状观察、病理剖检、实验室诊断、结果判定及样品处置等内容。

本文件适用于中华鳖养殖场地、水产苗种场、水产品质量检测机构及农业技术推广部门对中华鳖腮腺炎的临床筛查、确诊诊断及流行病学调查，涵盖稚鳖、幼鳖、成鳖各生长阶段。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB11607渔业水质标准

GB/T18654.1养殖鱼类种质检验第1部分：抽样方法

GB/T18654.2养殖鱼类种质检验第2部分：计数方法

GB/T27634水生动物疫病实验室检测质量控制规范

NY/T5361无公害食品中华鳖养殖技术规范

NY/T718水生动物产地检疫规范

NY/T1671水生动物病毒学检测采样与保存技术规范

SN/T1151.1水生动物检疫抽样规范第1部分：鱼类

SN/T1151.2水生动物检疫抽样规范第2部分：两栖类、爬行类

SC/T7016.3鱼类病毒核酸检测第3部分：实时荧光定量PCR法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

中华鳖腮腺炎：由中华鳖虹彩病毒（ChineseSoft-shelledTurtleIridovirus，CSTIV）引起的一种急性、高致病性传染病，又称“鳖腮腺炎病”“鳖出血性败血症”，主要侵害中华鳖的消化、呼吸及免疫系统，发病率和死亡率极高。

临床疑似病例：具有中华鳖腮腺炎典型临床症状，如颈部肿胀、口腔分泌物增多、行动迟缓等，结合养殖环境及流行病学特征，未经过实验室确诊的病例。

确诊病例：经临床症状观察、病理剖检结合实验室检测（病原学检测阳性）确认的中华鳖腮腺炎病例。

组织病理学检查：通过对病变组织进行固定、切片、染色，在显微镜下观察细胞形态及组织病变特征，为疾病诊断提供病理依据的方法。

病原学检测：通过核酸扩增、病毒分离培养等技术，直接检测样品中中华鳖虹彩病毒的方法，是中华鳖腮腺炎确诊的核心依据。

4诊断原则

遵循“临床筛查-病理佐证-病原确诊”的三级诊断原则，结合流行病学特征、临床症状观察和病理剖检结果进行初步判断，通过实验室病原学检测实现最终确诊。诊断过程应严格遵守GB/T27634规定的质量控制要求，确保检测结果准确、可靠、可追溯。

流行病学调查应重点关注养殖密度、水温、水质状况、苗种来源、发病时间及周边养殖场地疫情情况，为诊断提供辅助依据。

5样品采集与保存

5.1采样原则

采样应遵循随机性、代表性原则，参照GB/T18654.1、SN/T1151.2执行。发病场地采样应覆盖不同生长阶段、不同发病程度（发病个体、疑似感染个体、健康个体）的中华鳖，同时采集养殖水体、底泥及投喂饲料样品，每份样品标注采样时间、地点、样品类型、生长阶段等信息。

5.2采样方法

活体样品：选取发病及疑似发病中华鳖5~10只/批次，体重小于50g的稚鳖取样数量加倍。用无菌棉签擦拭口腔、鼻腔分泌物；用无菌注射器从静脉窦或心脏采血2~5mL，注入抗凝管中，颠倒混匀；解剖后无菌采集肝、脾、肾、脑、鳃状组织各0.5~1.0g，分别放入无菌离心管。

死亡样品：选取新鲜死亡（死亡时间不超过2h）个体3~5只，无菌采集肝、脾、肾、脑、鳃状组织及病变明显的颈部组织，每份样品0.5~1.0g，放入无菌离心管。

环境样品：采集养殖水体500mL/份，装入无菌采样瓶；采集底泥200g/份，装入无菌密封袋；采集投喂饲料100g/份，装入无菌密封袋。

5.3样品保存与运输

样品采集后立即置于4℃冷藏（保存不超过24h）或-20℃冷冻（短期保存，不超过72h），长期保存需置于-80℃冰箱。运输过程中使用保温箱，加入足量冰袋或干冰，确保样品低温稳定，避免反复冻融。病理组织样品可放入4%多聚甲醛固定液中固定，固定液体积为样品体积的10~15倍，常温运输。所有样品运输过程中应做好防泄漏、防污染措施，附采样记录表。

6临床症状观察

6.1外观症状

稚鳖、幼鳖：发病初期精神萎靡，食欲减退，行动迟缓，常漂浮于水面或趴在池边，对外界刺激反应迟钝。随着病情发展，颈部明显肿胀，呈“腮腺炎”状，口腔张开，分泌大量白色或淡黄色黏液，严重时黏液堵塞口腔，导致呼吸困难。体表皮肤充血、出血，尤以腹部、四肢内侧明显，部分个体出现溃烂、脱甲现象。

成鳖：症状与稚鳖、幼鳖类似，但发病进程相对缓慢，颈部肿胀程度不一，部分个体仅轻微肿胀。病鳖体重下降，背部甲片失去光泽，质地变软，严重时出现腹水，腹部隆起，按压有液体渗出。

6.2行为与摄食特征