2024高考生物：PCR引物设计.docxVIP

①引物的选择

②引物的序列推断

③引物的装饰

引物的5′端决定着PCR产物的长度，它对扩增特异性影响不大。因此，可以被修饰而不影响扩增的特异性。引物5′端修饰包括：加酶切位点；标记生物素、荧光、地高辛、Eu3+等；引入蛋白质结合DNA序列；引入点突变、插入突变、缺失突变序列；引入启动子序列等。

引物的设计：引物的作用：使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸

①引物的5’端能与模板链的3’端进行碱基互补配对

②引物之间或引物内部，不能发生互补配对

（2023年山东高考）科研人员构建了可表达J-V5融合蛋白的重组质粒并进行了检测，该质粒的部分结构如图甲所示，其中V5编码序列表