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RNA提取

华中石和雷・布雷斯安

摘要

RNA提取是分子生物学实验室中的常规技术。从植物中提取的高质量RNA是成功进行

后续实验（如逆转录‑聚合酶链反应、Northern杂交、cDNA文库构建和微阵列分析）的前

提。本文描述了两种在拟南芥中提取RNA的方法：小规模和大规模。使用小规模方法提取

的RNA可以应用于大多数下游应用。建议仅用于Northern杂交的大规模RNA制备。

关键词：RNA提取；基因表达；RNase抑制剂；拟南芥。

1.引言

遗传信息从DNA序列流向RNA，再进入蛋白质序列。RNA是基因表达中连接

DNA和蛋白质的信息桥梁。RNA水平的分析为基因表达和调控提供了重要信息。R

NA的分离和纯化已成为常规分子技术，用于Northern杂交、逆转录‑聚合酶链反应（

RT‑PCR）、cDNA末端快速扩增（RACE）、体外翻译和cDNA克隆等操作。在过去的

几年里，植物组织RNA分离的简便性和成功率有了显著提高。然而，初学者在RNA提取

过程中仍面临RNA降解的严重问题，这是由于难以抑制的RNase活性所致。已经开发出

多种方法，并且生物技术公司提供了许多用于小规模和大规模RNA分离的试剂盒。(1–

3)。在这里我们描述了两种总RNA提取的方法。根据我们的经验，这些方法对拟南芥非

常有效，也应适用于大多数其他