【毕业论文】杂交稻种子萌发中淀粉酶活性的研究.docVIP

【标题】杂交稻种子萌发中淀粉酶活性的研究 【作者】谭 畅 【关键词】杂交水稻　　种子萌发　　淀粉酶 【指导老师】冉景盛 【专业】生物科学 【正文】1?引言水稻是我国主要的粮食作物，其播种面积占全部粮食作物面积的30%，产量则占粮食作物产量的40%。我国人口迅速膨胀，提高粮食产量日显紧迫。杂交水稻的成功培育极大地缓解了我国日益紧张的粮食问题，为我国粮食生产提供了一条根本出路。禾本科植物水稻（Oryza sativum L.）、小麦(Triticumaestivun L.)、大麦(Hordeun sativun L.)、燕麦(Avena fatva L.?)等在收获前遇到连续高温高湿的天气，容易出现籽粒穗上发芽的现象即穗萌发[1~3]。近年来呈现增长趋势，由于种植制度要求种子有短的休眠期才能满足夏季播种，从而产生了不利于休眠性品种的选择，在现代育种过程中，为加快品种的选育周期，异地加快世代繁育，也增加了无休眠种子的选择，导致了新品种穗萌发普遍升高。对早熟品种的片面追求，也导致育成品种的穗萌发率上升。同时随近年来环境的一些变化及一些化学调控剂在水稻生产上的应用，水稻穗萌发程度比以往明显增加。在长江中下游双季稻区，成熟季节正值梅雨期，收获前穗萌发现象尤为突出。水稻休眠期较短或不明显，成熟期或收获季节遇到高温多雨天气，穗上特别容易发芽。近几年在杂交水稻制种生产上，穗萌发更是一个突出的问题，无论是春季制种还是夏季制种，都有不同程度的穗萌发现象。据资料统计，在春制、春繁中，种子穗萌发一般在5～10％，有的年份个别地方萌发率已达30～50％。严重影响种子的使用价值和种子生产的经济效益。如何有效的防止穗萌发的发生，以提高杂交稻种子的产量与质量是杂交水稻制繁种中急需解决的问题。穗萌发与种子萌发呈高度正相关，一般情况下种子萌发率可作为穗萌发的间接指标[4]。目前，国内专家学者对杂交水稻穗萌发现象进行了大量研究。廖宇静，周清元等[5]对岗46A三系及F1种子发芽中淀粉酶活性测定表明：水稻萌发与淀粉酶的消长有很大关系；廖宇静，周清元等[6]用抑制剂对不育系岗46Ａ及F1种子萌发中淀粉酶活性进行分析，在水稻种子萌发中，内存系列酶，由原束缚态酶转变为激活态酶，a-淀粉酶、脂肪酶等在原束缚态酶基础上重新合成，水稻种子萌发与淀粉酶的消长关系尤为明显；王熹，陶龙兴等[7]对外源脱落酸和马来酰肼对杂交水稻F1穗萌发的抑制效应进行初步的研究表明：脱落酸对杂交水稻协优2070及汕优10号的抑制为主，以MH相伴试。而对种子萌发与淀粉酶的关系研究甚少。淀粉酶广泛存在于植物体中，是活性较高的一种酶，为作物幼苗的形态建成和生长发芽提供主要的物质和能量来源。不同作物内淀粉酶的含量有较大差异，且淀粉酶活性还受环境条件的影响。如：干旱胁迫能使淀粉酶活性升高[6~10]种子中的营养物质主要为淀粉，淀粉的合成、运输等主要与淀粉酶有关。其体内的淀粉酶主要有β－淀粉酶和a-淀粉酶。本实验选用涪陵常见的水稻品种，利用3, 5-二硝基水扬酸法测定胚乳中淀粉酶活性变化[11~18]，探讨杂交水稻萌发与淀粉酶的相关性。2?材料与方法2.1?材料2.1.1?供试材料宜香A，涪恢9303，宜香9303，中九A，涪恢9801，中优9801（重庆市涪陵区农科所提供）；岗46A，R-527（四川省农科院提供）。2.1.2?仪器设备冷冻离心机（日立22G型，天津科美有限公司），可见分光光度计（VIS-7220，北京瑞利分析仪器公司），电子天平（MP型系列，上海恒平科学仪器有限公司），恒温水浴锅。2.1.3?药品3，5-二硝基水杨酸，NaOH，酒石酸钾钠，麦芽糖，淀粉，海砂，蒸馏水，柠檬酸，柠檬酸钠。2.2?方法2.2.1?试剂的配制2.2.1.1?标准麦芽糖溶液（1 mg/mL）精确称取100 mg麦芽糖，用蒸馏水溶解并定溶至100 mL。2.2.1.2 NaOH（2 mol/L）溶液精确称取16 gNaOH，用蒸馏水溶解并定溶至200 mL。2.2.1.3 3,5-二硝基水杨酸精确称取10 g3,5-二硝基水杨酸，溶于200 mL2 mol/L的NaOH溶液中，加入500 mL蒸馏水，再加入300 g酒石酸钾钠，待溶解后用蒸馏水定溶至1000 mL。2.2.1.4?柠檬酸缓冲液称取柠檬酸21.01 g，用蒸馏水定溶至1 L，即为0.1 mol/L的柠檬酸溶液。称取柠檬酸钠29.41 g，用蒸馏水溶解并定溶至1 L，即为0.1 mol/L的柠檬酸钠溶液。取柠檬酸溶液275 mL与柠檬酸钠溶液725 mL混匀，即为0.1mol/L pH5.6的柠檬酸缓冲液。2.2.1.5?淀粉溶液称取1 g淀粉溶液溶于10 mL0.1 mol/LpH5.6的