电喷雾串联质谱中子离子相对强度稳定性的研究.pdfVIP

广西师范大学学报(自然科学版) 2003年 10月 JOURNALOFGUANGXINORMALUNIVERSITY Vol.21 No.2 电喷雾串联质谱中子离子相对强度稳定性的研究 孙 萍 ，罗国安 f清华大学 化学系 北京 100084) 电喷雾电离 串联质谱(ESI-MS/MS)具有高选择性、高灵敏度等显著优点，被广泛地应用于生物、药 物、环境等领域.但是，与电子轰击电离一质谱相比，它的局限性在于:离子化效率受基质影响显著，稳定性 相对较差;串联质谱中的碰撞诱导解离反应 C〔ID)受碰撞能量等反应条件变化的影响，产物离子的种类和 强度都有显著变化，因此，ESI-MS-MS谱图很难进行相对强度比较及谱图检索等工作，关于电喷雾一串联 质谱中子离子相对强度稳定性的报道很少，本项研究以常见的三类化合物一生物碱、有机酸、氨基酸为分 析对象，考查了10种待测物(生物碱 4种;有机酸;3种;氨基酸:3种)在最佳碰撞能量条件下的子离子相 对强度的稳定性，发现在一定条件下子离子相对强度与被测物的浓度无关，具有稳定性，这为复杂基质中 的快速定性提供了可能性. 1 实验 分析对象为青藤碱、可待因、槐定碱、氧化苦参碱、大黄酸、巴比妥酸、甘草次酸、天冬氨酸、色氨酸、苯 丙氨酸，配制6:0,0.60,0.060mg/I的甲醇标准溶液. 质谱仪器为API300。三级四极杆质谱仪W(E公司).生物碱分析:正离子模式，电离电压为4800V; 有机酸和氨基酸分析:负离子模式，电离电压一3800V. 优化质谱条件 使用甲醇标准溶液优化质谱条件，采用注射器泵以。.3mI,/h连续进样.选取丰度最 大的四个或三个子离子，利用八PI300。质谱仪中的 “Automaticoptimize”功能分别优化，得到各个子离子 的质谱最佳碰撞能量. 流动注射进样一串联质谱检测子离子强度 取20川_待测溶液，采用流动注射进样，流动相流速为 0.25mL/min，流动相为甲醇一水(体积比为80:20).串联质谱检测为多反应监测模式 对于每种待测物， 监测4个或3个母离子(分子离子)-子离子对，碰撞能量设置为各反应对的最佳碰撞能量，驰豫时间为 75ms，每个样品的分析时间为2min.10种待测物3个不同浓度的标准溶液流动注射法进样两次.子离子 流峰面积的比例取6次结果的平均值，并计算精密度. 2 结果与讨论 对于同一待测物，做子离子扫描(Productionscan)，得到它的碎片信息.选取强度最大的四个或三个 子离子，优化各个碎片的最佳碰撞能量:利用 10种化合物的子离子和最佳碰撞能量参数为每个化合物设 置4个或3个MRM扫描.1。种待测物的监测反应如表 1所示. 采用多反应监测模式的串联质谱检测，每一样品可得到提取子离子流图，积分子离子流的色谱峰，得 到子离子流的积分面积，计算较强子离子与最强子离子峰面积的比值，子离子的相对强度就由子离子流峰 作者简介 罗国安((1946-)，男 教授.研究方向:生命分析化学.E-mail:Iuoga@mail.tsin妙二 。d 第 21卷 广西师范大学学报(自然科学版) 面积的比值获得，计算6次(每种待测物配有3个浓度，每个浓度的溶液分析2次)结果的平均值与相对标 准偏差(RSD),RSD结果如表2示. 表2中子离子流峰面积比例的相对标准偏差(RSD)的结果表明，10种待测物的RSD，只有不足10% 的RSD在5.2%-8.7%之间，其余的均小于等于5.2.这表明了在正离子与负离子模式下，这些物质的 子离子流峰面积比例稳定，在一定浓度范围内子离子相对强度与物质的浓度无关.由于我们进行的质谱检 测是在最佳碰撞能量条件下进行，因此子离子相对强度的稳定性远远优于有关报道. 我们考察了3类常见有机物— 生物碱、有机酸、氨基酸,2种质谱模式— 正离子与负离子模式，发 现了在最佳碰撞能量下，电喷雾一串联质谱检测中，子离子相对强度具有很好的稳定性，而与被分析物的浓 度基本无关.因此子离子相对强度可以作为定性分析的一个依据，该发现可以应用于复杂基质中高选择 性、高灵敏度的快速定性检测. 表1 待测物的质谱监测反应 类别