负载HCMV pp65 341-349抗原肽的HLA-A2402四聚体的制备及其应用.pdfVIP

螺杆菌感染及其对食管癌细胞系 Eca-109 增殖和凋亡的影响 中文摘要 目的 研究人食管癌中是否存在螺杆菌感染，并体外实验观察螺杆菌感染对食管癌细胞增 殖和凋亡的影响，从而探讨螺杆菌感染在人食管癌发生发展中的意义。 方法 随机收集食管癌标本 38 例和正常食管标本 12 例，采用聚合酶链反应（PCR）扩增 螺杆菌16S rDNA，并进行基因测序及与GenBank公布的幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H pylori ）16S rDNA进行同源性比较，再将H. pylori 标准株NCTC11637提取物与食管鳞癌 细胞株 Eca-109 共培养不同时间后采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活 性，半定量 RT-PCR 技术分析共培养不同时间后 Eca-109 细胞 PCNA mRNA 的表达水平， 同时用流式细胞术检测细胞凋亡率。 结果 食管癌组织中螺杆菌 16S rRNA 基因的检出率为 34.2% （13/38），正常人食管组织 无一例阳性表达。对 4 例 16S rRNA 基因扩增物的测序及与GenBank公布的H.pylori 16S rDNA 同源性比较，食管癌组织中螺杆菌序列与H.pylori 同源性达 99～100%。不同浓度 的H.pylori 菌体提取物作用Eca-109细胞后 ,可见提取物在较低浓度时Eca-109细胞增 殖明显，而在较高浓度时出现细胞凋亡。在与Eca-109细胞共同孵育后PCNA mRNA表达 升高；流式细胞术检测显示 H.pylori 提取物以浓度相关方式诱导食管癌Eca-109细胞凋 亡。 结论 我国人食管癌组织中发现螺杆菌16S rDNA，提示食管癌组织中存在螺杆菌感染， 该螺杆菌可能为H.pylori 或者其亚种。H.pylori 能诱导食管癌Eca-109细胞PCNA mRNA表达 升高，以及细胞增殖与凋亡间的不平衡，提示螺杆菌较低程度的繁殖引起的慢性感染可 能也是食管癌发生的原因之一。 关键词 食管癌；螺杆菌；细胞增殖；细胞凋亡；增殖细胞核抗原；流式细胞术 I Helicobacter infection and its impact on the proliferation and apoptosis of human esophageal cancer cell line Eca-109 Abstract Objective To investigate whether there is an infection of Helicobacter in esophageal carcinoma and the influence of Helicobacter on the proliferation and apoptosis of human esophageal cell line Eca-109 cells in vitro experiment for exploration of Helicobacter infection in the significance of occurence of human esophageal carcinoma. Methods 38 samples of esophageal carcinoma and 12 samples of normal esophageal tissues were randomly collected. Helicobacter-specific 16S rDNA were amplified with polymerase chain reaction (PCR). The target amplification products were sequenced and compared with 16S rDNA of H.pylori .published by GenBank. Then esophageal cancer cell line (Eca-10