损伤胰腺提取液在促进BMSCs分化为胰岛素分泌细胞的机制研究.pdfVIP

暨南大学暨南大学硕士论文硕士论文 暨南大学暨南大学硕士论文硕士论文 摘摘 要要 摘摘 要要 第一第一部分部分: 损伤胰腺组织提取液对大鼠损伤胰腺组织提取液对大鼠 BMSCs 转分化为转分化为 第第一一部分部分 损伤胰腺组织提取液对大鼠损伤胰腺组织提取液对大鼠 转分化为转分化为 胰岛素分泌细胞的影响胰岛素分泌细胞的影响 胰岛素分泌细胞的影响胰岛素分泌细胞的影响 目的目的: 目的目的 在大鼠损伤胰腺组织提取液促进 BMSCs 转分化为胰岛素分泌细胞过程中，动态检测 转分化的胰岛素分泌细胞胰腺发育相关基因、蛋白、以及细胞形态的变化，探讨损伤胰腺 组织提取液对 BMSCs 转分化为胰岛素分泌细胞的效果和机制。 方法方法：： 方法方法：： 将 SD 大鼠胰腺切除 90%，两天后处死大鼠取剩余胰腺组织匀浆，提取组织液。在大 鼠BMSCs 培养过程中加入损伤胰腺组织提取液，培养 14 天，动态检测大鼠 BMSCs 是否 有胰腺发育相关基因和蛋白的表达，以及细胞形态学改变，对转分化的胰岛素分泌细胞检 测胰岛素阳性细胞效率，葡萄糖刺激实验评价转分化的胰岛素分泌细胞分泌胰岛素的水 平。 结果结果: 结果结果 损伤胰腺组织提取液可以诱导大鼠 BMSCs 转分化为胰岛素分泌细胞，在转分化过程 中依次表达与胰腺发育密切相关的基因，如PDX1 ，NKX6.1 ，GLUT2，PC2 ，C 肽等；也 表达成熟胰腺表达的蛋白，如：C 肽，Insulin ，Nkx6.1 等；分泌胰岛素的细胞占 13.3±1.8%， 胰岛素分泌水平为天然胰岛的 1/201/50。 结论结论: 结论结论 胰腺损伤后，损伤胰腺组织分泌富含胰腺修复和发育分化的相关蛋白，这些蛋白可 以促进大鼠 BMSCs 向胰岛素分泌细胞分化。 关键词关键词：大鼠： ；骨髓间充质干细胞；胰腺组织提取液；分化；胰岛素分泌细胞 关键词关键词：： I 暨南大学暨南大学硕士论文硕士论文 暨南大学暨南大学硕士论文硕士论文 第二第二部分部分 应用飞行时间质谱技术筛选损伤胰腺组织提取液中应用飞行时间质谱技术筛选损伤胰腺组织提取液中 第第二二部分部分 应用飞行时间质谱技术筛选损伤胰腺组织提取液中应用飞行时间质谱技术筛选损伤胰腺组织提取液中 促进转分化的相关蛋白促进转分化的相关蛋白 促进转分化的相关蛋白促进转分化的相关蛋白 目的目的：： 目的目的：： 损伤胰腺组织提取液富含促进 BMSCs 转分化为胰岛素分泌细胞的相关蛋白，应用飞 行时间质谱技术，对损伤胰腺蛋白提取液和正常胰腺蛋白提取液进行差异性蛋白筛选，寻 找能高效定向诱导 BMS