小檗碱和育亨宾抑制小鼠内毒素性心功能障碍的机制研究.pdfVIP

中文摘要 目 的 观察小檗碱和 α 肾上腺素能受体拮抗剂育亨宾对小鼠内毒素性心功能障碍 2 的影响，进一步探讨其作用机制，为脓毒症性心功能障碍的治疗提供一种新的策 略。 方 法 小鼠随机分为 8 组：对照组(control) ，脂多糖组(LPS) ，小檗碱防治组 (Ber+LPS) ，小檗碱和育亨宾防治组(Ber+yohimbine+LPS) ，育亨宾防治组 (yohimbine +LPS)，小檗碱对照组(Ber)，小檗碱和育亨宾对照组(Ber+ yohimbine)， 育亨宾对照组(yohimbine)，分别用蒸馏水，小檗碱(50 mg/kg) ，小檗碱+育亨宾 (50 mg/kg+2 mg/kg) ，育亨宾(2 mg/kg)灌胃，每天 1 次，连续 3 d，第 3d 灌胃后 1h，腹腔注射 LPS(20mg/kg)或生理盐水。于腹腔注射 LPS 后不同时间，观察各 组小鼠心脏的组织结构变化；用 VisualSoniesR Vevo770TM 高分辨小动物超声系统 测定小鼠左心室收缩和舒张功能；用硫代巴比妥酸显色法检测心肌组织丙二醛 (MDA)含量；羟胺法测定心肌超氧化物歧化酶(SOD)活力；蛋白免疫印迹分析心 肌髓过氧化物酶(MPO)的含量；用 ELISA 方法测定心肌肿瘤坏死因子-α(TNF-α) ， 白介素 1-β(IL1-β) 的含量；硝酸还原酶法测定心肌一氧化氮(NO) 的水平；进一步 用 TUNEL 法检测凋亡心肌细胞；用酶荧光法检测心肌凋亡蛋白酶-3(caspase-3) 的活性；并用 RT-PCR 法检测心肌组织 Toll 样受体-4(TLR-4)mRNA 的表达；蛋 白免疫印迹方法分析心肌核转录因子抑制物κBα(IκBα) 的磷酸化水平。 结 果 1. 小檗碱和育亨宾均能明显减轻 LPS 引起的心肌组织损伤，改善内毒素血 症小鼠心功能障碍，增强心肌的收缩和舒张功能。 2. 各组小鼠心肌中 MDA 和 SOD 的水平未见显著差异，小檗碱、小檗碱和 育亨宾合剂以及小檗碱可以抑制心肌中 LPS 引起的 MPO 含量的升高，但育亨宾 并无此作用。小檗碱和育亨宾均能明显降低 LPS 攻击小鼠心肌 TNF-α，IL-1β和 NO 的水平。 3. 小檗碱和育亨宾均能降低内毒素血症小鼠心肌细胞的凋亡率，抑制 I caspase-3 的活化。 4. 腹腔注射 LPS 后 1h 各组小鼠心肌 TLR-4 mRNA 的表达没有明显变化。 小檗碱和育亨宾均能抑制内毒素血症小鼠心肌 IκBα的磷酸化。 结 论 小檗碱和育亨宾预处理均能抑制小鼠内毒素性心功能障碍，其机制可能与减 少心肌细胞凋亡和抑制心肌 IκBα的磷酸化，减少TNF-α，IL-1β与 NO 的产生有 关。小檗碱的上述作用并不依赖于它的 α 肾上腺素能受体激活作用，体内 α 肾 2 2 上腺素能受体激活参与了 LPS 性心功能障碍的发生机制。小檗碱和育亨宾合剂 的应用可能为内毒素性心功能障碍的治疗提供新的手段。 关键词 中性硫酸小檗碱；育亨宾；内毒素血症；心功能；凋亡；细胞因子；小鼠 II Abstract Objective To observe the effects of berberine (Ber) and yohimbine (Y) on cardiac dysfunction in endotoxemic mice and further explore the mechanisms of their actions for providing an effective therapeutic strategy in the treatment of septic cardiac dysfunc