反相高效液相色谱法测定伏立诺他含量和有关物质.pdfVIP

, :;:;; ; 一一一??一一一一一一一一~.~一一 一,一一?一一 反相高效液相色谱法测定伏立诺他含量和有关物质 邹巧根 ,胡紫艳 ,韦 萍南京工业大学制药与生命科学学院,南京 ; 江苏省药物研究所有限公司,南京 摘要 目的:建立伏立诺他含量及有关物质的反相高效液相色谱测定方法。方法:采用 色谱柱. ,;含量测定以 . %磷酸溶液 三乙胺调节 值至 . 一乙腈:为流 动相,有关物质采用梯度洗脱;流速为 ~;检测波长为 。结果:伏立诺他与各杂质之间均达 到良好分离,伏立诺他在 . ~范围内呈良好的线性关系 ,其最低检测限为 . / 。结论:该方法简便、准确、可靠,适用于伏立诺他的质量控制。 关键词 伏立诺他;反相高效液相色谱法;含量测定;有关物质 中图分类号 . ; . 文献标志码 文章编号 ? ?? , ? ,,, , ; , , : ?? . : ? ., . %. :... 一 . : . ? . ~. / . : , . ; ? ; ; 伏立诺他即辛二酰苯胺氧肟酸 我国尚未上市。其化学名称为Ⅳ一羟基一Ⅳ一苯基辛 烷二酰 ? ??,结构, ,是一种新 型的分子靶向抗肿瘤药物 。 ,通过抑制蛋白去乙 式如图 。 酰基酶 , 而使细胞周期 停滞和/或细胞凋亡 。该药用于治疗经两个全身 \ 治疗方案后仍进展、耐药或复发的具有明显皮肤侵 犯的皮肤 细胞淋巴瘤 。伏立诺他由 图 伏立诺他结构式 公司开发,于 年获得美国批准上市,在 作者简介 邹巧根,男,副教授,主要从事药物现代仪器分析研究。 有文献报道人血清中伏立诺他的液质联用检测 联系电话: , ? : . 。 方法? ;作者目前还未见有关伏立诺他质量控制 【通讯作者 韦萍,女,博士,教授,博士生导师,主要从事生化工程、 的报道。合成工艺提示,在伏立诺他的制备过程中 酶工程和工业微生物研究。联系电话: ,:.. .。 可能残留的中间体及副产物有 种,分别为杂质中国新药杂志 年第 卷第 期,~ ,结构式见图 。其中 为反应催化剂, 和 质进行检测分析,对于该药在生产及贮藏环节的质 为中间体, 和 为可能的反应副产物。对这些杂 量控制具有重要意义。 。 \/\/\/ \ / 、、、, /,、 \ \ /\一一一 。、 ? / 、、,一/、、\,/ 、、 :辛二酸二酰苯胺; :辛二酸单酰苯胺; :对甲苯磺酸; :辛酰苯胺酸甲酯; :辛二酸苯基酰胺 苯基氨基甲酰基庚酰基氧基 一酰胺 图 杂质的结构式 溶液的配制 仪器与试药 取伏立诺他对照品或伏立诺他供试品 , 高效液相色谱仪 二极管阵列 置 量瓶中,加 %乙腈溶解后,精密吸取 检测器, 色谱工作站,美国公司 。 ,置量瓶中稀释至刻度,配制成? 伏立诺他样品 南京海纳医药科技有限公司制 的溶液,即得对照品或供试品溶液。 备,批号: , ,;伏立诺他专属性 对照品 南京海纳医药科技有限公司,批号: 分别取 种杂质及伏立诺他对照品适量置 一 ,色谱纯度为 . % ;辛二酸二酰苯胺、量瓶中,稀释成一定浓度的混合溶液,进样分析, 辛二酸单酰苯胺、对甲苯磺酸、辛酰苯胺酸甲酯和辛 记录色谱图。伏立诺他与其他杂质峰分离度良好, 二酸苯基酰胺 .苯基氨基甲酰基一庚酰基氧基 .酰 峰纯度好,理论塔板数按伏立诺他峰计算≥ , 胺 南京海纳医药科技有限公司 。乙腈、三乙胺为 色谱图见图 。 色谱纯;水为纯化水;其他试剂均为分析纯。 方法与结果 色谱条件 色谱柱: .,; 图 专属性试验色谱图 含量测定用流动相为乙腈 . %磷酸溶液 用三乙 胺调节 至 . :;有关物质采用梯度洗 线性关系 脱,见表 。检测波长为 ;流速为取伏立诺他对照品置量瓶中,加 ;进样量为 ;柱温为室温。 流动相溶解并稀释至刻度,依次稀释成浓度为 . , . , . , . , . ,.的溶液,分 表 梯度洗脱条件 别精密量取进样,记录色谱图。以样品浓度, 为横坐标,峰面积为纵坐标进行 线性回归,得到回归方程为: 一 : 。表明伏立诺他在 . ~范围 内线性关系良好。 仪器精密度 取伏立诺他对照品溶液,在上述液相色谱条件 下重复进样 次,记录峰面积,其为 . %,表 明本系统精密度良好。 獬 中国新药杂志 年第 卷第 期,重复性 约为满量程的 %~ %,再精密量取供试品溶液 取一批供试品 份,精密称定,配制供试品溶 和对照溶液各 ,分别注入液相色谱仪,记录色 液,分别进样,测得平均含量为 . %,为 谱图。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰,记录各 . %,表明本方法重复性良好。 杂质峰面积及各杂质峰面积的和与对照溶液主峰面 积比值,用自身对照法计算 各杂质量不得大于 稳