氧化硅包裹的磁性纳米粒子分离纯化质粒DNA（英文）.pdfVIP

ISSN 1007—7626 中国生物化学与分子生物学报 2009年 10月 CN ll-3870／Q ChineseJournalofBiochemistryandMolecularBiolo~ 25(10)：958～962 · TechniquesandMethods IsolationandPurificationofPlasmidDNA by Silica-coatedMagneticNanoparticles wu Neng—Biao ，XUELian ，CHEN Li．Na2 ZENGXian—Sheng SHENG Rong．Sheng3 ， (”SchoolofLfieSciences，SouthwestUniversity，Chongqing 400715，China； SchoolofChemistry，SouthwestUniversity，Chongqiag 400715，China； ”ChallengerMediTechCompany， Ltd，301．1，326EdisonRoad，Zhan~iangHighTechPark，Shanghai 201203，China) Abstract Toobtainhigh—qualitypurifiedplasmidDNA iscriticalforexperimentalstudiesinmolecularbiology andbiomolecularanalysis．Wehavedevelopedasimpleandreliablemethodofrtherapidisolationofplasmid DNA from crudecelllysateswith silica．coatedmagneticnanoparticleswith an averagediameterof20 nm ． pUC19plasmidweresuccessfullyenrichedandpurifiedfrom theE ．colDH5aunderthemagneticfields．The obtained plasmid retained native the bioactivity to be used ofr restriction enzyme digestions and ceH transofrmations． Keywords silica·coatedmagneticnanoparticles；plasmidDNA；isolationandpurification 氧化硅包裹的磁性纳米粒子分离纯化质粒 DNA 吴能表” ， 薛 莲”， 陈丽娜 ， 曾献生 ， 盛蓉生” (西南大学生命科学学院，重庆 400715； 西南大学化学化工学院，重庆 400715； ”卡南吉医药科技(上海)有限责任公司，上海 201203) 摘要 质粒的分离纯化在分子生物学实际工作 中占有重要地位 ．本文采用氧化硅包裹的磁性纳米 粒子 ，平均粒径为20nm左右，在外加磁场的作用下，从细胞粗提掖 中快速分离质粒 DNA．用这种方 法成功地从大肠杆菌DH5a浓缩和纯化得到了pUC19质粒 ，该质粒具有生物活性 ，可直接用于限制 性酶切和细胞转化等分子生物学下游操作 ． 关键词 氧化硅包裹的磁性纳米粒子 ；质粒 DNA；分离纯化 中图分类号 Q782 To isolatehigh quality，bioactiveplasmid DNA is