日本血吸虫可溶性虫卵抗原诱导小鼠巨噬细胞增殖及TNF-α、TGF-β1的表达.pdfVIP

苏州大学学报 (医学版)2011；31(6) 913 日本血吸虫可溶性虫卵抗原诱导小鼠巨噬细胞增殖 及 TNF-oc、TGF-p1的表达 徐会娟 ，朱阳泉 ，帅连云 ，成 涛 (1．江苏大学基础医学与医学技术学院 病原生物系，江苏镇江 212013；2．镇江市中心血站 检验科，江苏镇江212001) 摘要：目的 探讨 13本血吸虫可溶性虫卯抗原(SEA)对小鼠巨噬细胞株 RAW264．7增殖及TNF．ot、TGF．131表 达的影响。方法 实验分三组 ：RAW264．7对照组 、SEA组和细菌脂多糖 (LPS)对 照组。培养 巨噬细胞株 RAW264．7，用2O mlSEA分别作用巨噬细胞3、6、9、12和15h后，荧光定量PCR检测炎症因子TNF—or．mRNA和 TGF-BlmRNA的表达；倒置显微镜观察SEA作用 12h后巨噬细胞的形态；Westernblot检测炎症相关蛋白TNF．ot 和TGF一81的表达；MTr比色法检测SEA对细胞增殖的影响。结果 SEA作用 RAW264．7细胞3h起 ，TNF．or．mR． NA和TGF—B1mRNA的表达逐渐增高，在第 12h时，其相对表达倍数分别达23．07±3．172和9．83±1．45，与其他 各时间点比较差异均有统计学意义(均P0．05)；SEA作用 12h巨噬细胞体积明显增大，细胞拉长且形态不规则； SEA作用巨噬细胞24、48、72h时，A。值分别与RAW264．7对照组相比，差异均有高度统计学意义 (均P0．01)， 而与LPS组的差异无统计学意义 (P0．05)；在SEA作用 RAW264．7细胞 12h时，TNF．0l和TGF—B1蛋白表达均高 于RAW264．7对照组 (均P0．05)。结论 SEA能促进巨噬细胞的增殖并诱导TNF—or．和TGF．B1的表达。 关键词：日本血吸虫；巨噬细胞；可溶性虫卵抗原；TNF—ot；TGF．131 中图分类号 ：R383．24 文献标识码：A 文章编号：1673—0399(2011)06—0913—04 ProliferationandTNF-0、【TGF-131ExpressionofMacrophage RAW264．7InducedbySolubleEggAntigenofSchistosomaJaponicum xuHui-juan，ZHUYang—quan。，SHUAILian—yun，CHENTao (1．DeptofPathogenBiology，SchoolofMedicalScienceandLaboratoryMedicine，JinagsuUniversity；JiangsuZhenjiang 212013，China；2．ClinicalLaboratory，ZhenjiangCentralBloodStation，JiangsuZhenjiang212001，China) Abstract：Objective ToexploretheeffectofproliferationandTNF一仅．TGF-t31expressionofmac- rophageRAW264．7inducedbysolubleeggantigen(SEA)ofSchistosomajaponicum．Methods Macro— phagesintheexperimentweredividedintothreegroups：theRAW264．7controlgronp，SEA group and Lip0polysaccharide(LPS)controlgroup．ThemacrophageRAW264．7wasculturedandstimulatedwith 20 mlSEAfor3，6，9，12and15hours，thentheexpressionofTNF一仅mRNAandTGF一131mRNA werecheckedbyquantitativePCR (qPCR)．AfterstimulatedbySEAofr12hour