护骨素对高糖诱导损伤的血管内皮细胞的保护作用及机制研究.pdfVIP

· 200 · 2012年 3月第 29卷第 3期 JClinInternMed．March2012．Vo1．29．No．3 · 临床基础研究 · 护骨素对高糖诱导损伤的血管内皮细胞的 保护作用及机制研究 向林 向光大 王浩华 董靖 [中图分类号]R58 [文献标识码]A [DOI]10．3969／j．issn2012．03．020 [摘要] 目的 探讨护骨素对高糖诱导的血管内皮细胞保护作用及机制。方法 人脐静脉 内皮细胞分别在正糖(5mmol／L葡萄糖)、高糖 (25mmol／L葡萄糖)、高糖+护骨素 (25mmol／L葡 萄糖+2 g／ml护骨素)、高渗 (5mmol／L葡萄糖 +20mmol／L甘露醇)环境下培养72小时。以流 式细胞术测定各组细胞的凋亡；Westernblot法分析各组细胞磷酸化核转录因子(NF·KB)抑制蛋白 激酶 B(p-IKKB)、NF-KB抑制蛋白激酶 B(IRK31)、NF-KB抑制蛋白 (IKBa)、bcl-2及 bax表达水 平。结果 (1)与正糖组相比，高糖组内皮细胞凋亡率显著增加 (P0．O1)；高糖 +护骨素组细胞 凋亡明显低于高糖组，而又高于正糖组(P0．05)；(2)与正糖组相 比，高糖组p-IKK31表达显著增 高(P0．01)，IKBa和bcl-2表达显著降低 (P0．O1)；高糖 +护骨素组 p-IKK31明显低于高糖组 ， 而又高于正糖组 (P0．05)，IKBa和 Bcl-2表达水平 明显高于高糖组，而又低于正糖组 (P 0．05)。结论 高糖通过激活IKK31／NF—KB信号通路引起血管内皮细胞凋亡；护骨素具有抗高糖诱 导的IKK31／NF．KB活性作用 ，从而降低内皮细胞凋亡，保护内皮细胞。 [关键词] 血管内皮细胞；高糖 ；凋亡；护骨素 ProtectiveeffectofosteoprotegerininvascularendothelialcellsculturedwiUlhighglucoseandits possiblemcehanism XIANG Lin，XIANG Guangda，WANG Haohua，eta1．WuhanClinicalMedciine Col~ge，SouthernMedcialUniversity，Wuhan430070，China [Abstract] Objective Toexploretheprotecteffectandmechanismofosteoprotegerinonapopto· sisinhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVEC)inducedbyhigh ucose．Methods Thecultured HUVECweretreatedwithnormalglucose(5mmol／L ucose)，highglucose(25mmol／L ucose)，high glucoseandosteoprotegerin(25mmol／L uc0se+2WS／mlosteoprotegerin)aswellashig【hpemreability (5reotol／Lglucose+20mmol／Lmannito1)for72h0urs，respectively．Apoptoticcellswereobservedby Flowcytometry，theexpressionofphosphorylationnucleartranscriptionfastorKB(NF—KB)inhibitingpro— teinkinaseB(p-IKKbeta)，NF-KBinhibitingproteinkinase母(IKKbeta)，NF-KBinhibitingprotein (IKBalpha)，bcl-2andbaxweretestedbyWesternblotting．Results (1)Compraedwithnormalglucose group．highglucosegroupinducedtheHUVECapoptosisdramatically(P0．O1)，highglucoseandosteo— protegeringroupprotectedagainsthighglucose—inducedapopto