环孢素A对体外人系膜细胞cyclin E,cyclin D1,p27~（kip1）蛋白表达的影响.pdfVIP

山西医科大学学报，2012年4月，第43卷 第4期 ·245 · 环孢素A对体外人系膜细胞 cyclinE，cyclinD1，p27p蛋白表达的影响 雒娇娇， 李荣山 ， 杨 鹏， 张瑞静， 白 波， 乔 唏， 邵 珊 (山西医科大学第二临床医学院肾内 科，山西省肾脏病研究所，太原 030001； 通讯作者，E—mail：rongshanli@yahoo．corn．an) 摘要： 目的 探讨环孢素A(CsA)对人系膜细胞增殖的抑制作用及细胞周期蛋白Dl、E、p27“表达影响。 方法 人系膜 细胞常规体外培养，分为实验组和对照组，实验组加入不同浓度的CsA(0．1，1，5i．zmol／L)干预。药物作用24，48，72h后MrII1 比色法测定细胞增殖情况。药物作用48h后采用流式细胞仪检测细胞周期。药物作用48h后Westernblot法检测细胞中cyc— IinD1、cyclinE、p27“蛋白质表达情况。 结果 CsA对人系膜细胞具有时间、浓度依赖性抑制作用；且浓度依赖性阻滞细胞 周期，使 Go／G．期细胞增多，S期细胞减少(P0．05)。CsA浓度依赖性下调cyclinD1、cyclinE蛋白，上调p27 蛋白的表达 (P0．05)。 结论 CsA通过下调cyclinDI、cyclinE蛋白，上调 p27 蛋 白的表达，调节细胞周期调控通路 ，阻滞细胞于 Go／G，期，有效抑制人系膜细胞的增殖。 关键词： 环孢素 A； 人系膜细胞 ； cyclinD1蛋白； cyclinE蛋白； p27“蛋白； 增殖 中图分类号： 1t329．2 文献标志码 ： A 文章编号： 1007—6611(2014)04—0245—40 DOI：10．3969／I．ISSN．1007—6611．20l2．40 ．002 EffectofCsAOilproteinexpressionofcyclniDIIcyclinEandp27 niculturedhumanmesangialcellsn／vitro LUOJiao-jiao，LIRong—shan ，YANGPeng，ZHANGRui-jing，BAIBo，QIAOXi，SHAOShan(DeptofNephrology，SecondClinical MedcialCollege，ShanxiMedcialUniversity，ShanxiKidneyDiseaseInstitute，Taiyuan030001，China； Correspond ingauthor，E-mail： rongshanli@yahoo．corn．cn) Abstract： 0 ctive ToexploretheeffectofCsA onproliferation，apoptosisandcellcycleofhumna mesangialceils． Metho ds HumanmesangialceHswereincubatedinvitrowithdifferentconcentrationsofCsA(0，0．1，1，5p．mol／L)．Theproliferationofhuman mesnagialcellswasdetectedafterincubatedwithdifferentconcentrationsofCsA for24，48，72hbyMq3assay，respectively．Cellcycle wasanalyzedat48hafterincubationbyflowcytometry．TheexpressionofcyelinD1，eyclinE andp27 proteinsincellnucleuswas assessedbyWesternblot． Results Theproliferationofhumna mesnagialcellswas inhibitedinatime-anddose-dependentmannerby CsA．Thecellcyclewas arrestedinGo／Glphase．ThepercentageofGo／GtphasecellsgraduallyincreasedwiththerisingofCsA con— centrations(P0．05)．TheexpressionofcyclinD1，cyclinEproteinsdecreasedincellnucleuswithhterisingconcentrationsofCsA， whileexpress