肌肉线粒体代谢功能评估新方法.pdfVIP

.. . . . . 综 述肌肉线粒体代谢功能评估新方法 聂秀利’,赵士艳 ,管 裸 ,石洪成 ,朱汇庆 ,严惟力 .上海交通大学医学院附属仁济医院核医学科,上海 ; .上海交通大学附属瑞金医院核医学科,上海; .复旦大学附属中山医院核医学科,上海; .复旦大学附属华山医院核医学科,上海 关键词:磁共振波谱;线粒体; 呼吸作用;骨骼肌; 体内;体外 中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ?? 线粒体是生物体最为重要的细胞器之一,对维持人体正 肌 与浓度的乘积 。该方法可重复利用 ,且与 常生理功能具有重要的作用,肌肉线粒体功能改变与衰老以 体外检测得到的柠檬酸合成酶活性具有较好的相关性¨ 。 及多种疾病的发生和发展相关。传统体外线粒体分离技术常 使用该方法检测时,参与个体必须进行简短的、小于最大强度 用于检测肌肉线粒体功能,近年来随着高分辨率呼吸运动测 的肌肉重复收缩。另外还需保证个体有足够的时间恢复以防 量仪的出现,体外线粒体检测方法有了很大的改进。同时磁 止疲劳或酸中毒对结果产生影响。 等¨ 使用该方法 共振波谱和近红外光谱学等非侵入性方法的应用使活体内肌 比较了人体侧部腓肠肌、中间腓肠肌、比目鱼肌以及胫骨前肌 肉线粒体功能评估成为可能。另外通过检测活体内单个线粒 的氧化能力后发现肌肉纤维类型组成和氧化能力之间并不是 体蛋白合成速率可进一步探究细胞核和线粒体基因编码线粒 直接相关的。 等 也做了类似的研究,发现用肌肉应 体蛋白的规律。 用模式而非其纤维组成来描述肌肉氧化能力更为合适。 三磷酸腺苷 , 合成 随着 在肌肉能量学研究中的广泛应用,它已成 线粒体的主要功能是通过葡萄糖、脂肪酸以及某些氨基 为非侵入性评估肌肉内能量代谢的首选方法 。因此仔细 酸氧化产生 。在三羧酸循环 , 探究该方法的准确度和精确度是至关重要的。遗憾的是,到 中,电子传递产生的能量通过二磷酸腺苷目前为止几乎没有研究者直接评估过恢复动力学用于检, 磷酸化作用保存到。 测肌肉线粒体功能的可靠性 圳。 . 体外方法 最大耗氧量 萤火虫体内的荧光素酶可催化以下两个反应?:荧光素 氧气是呼吸链中的最终电子受体,在复合体Ⅳ即细胞色 一荧光素腺苷酸 ;荧光素腺苷酸 一氧化荧光 素 氧化酶作用下被还原成水。由于氧气还原是合成 素 光。利用光度计检测发出的光可以测定生物样品 的必须前提步骤,因此线粒体功能可通过氧气消耗速率评估。 内产生最大速率 引。待测线粒体须从新鲜组织分离, . 体外方法 因为冰冻处理可破坏线粒体膜结构。已有研究者利用该方法 高分辨率呼吸运动测量仪的应用使极少分离线粒体 发现肌肉线粒体功能与胰岛素敏感性和肥胖症均不存在相关 . 以及针刺活组织肌肉纤维 氧化能力的检测 性 ;另有研究表明给予年轻者支链氨基酸可使肌肉线粒体 成为可能 。由于该仪器具有较高的灵敏度以及精确的温 度和搅拌控制,因此尤其适合检测小剂量组织。该方法检测 代谢能力增强,而老年人中却未获得相同实验结果 。 . 体内方法 线粒体功能具有以下优势,即可在多呼吸链水平评估呼吸能 力;相同组织样品可连续检测;尤其适用于极少剂量分离线粒 磁共振波谱, 是根 体和肌纤维氧化能力检测 。。 。最近,等‘” 阐明了 据核磁共振的原理检测强磁场内元素原子核的磁性,分析得 到的光谱确定代谢物浓度的一种技术,可非侵人性地检测含 该方法在较瘦和肥胖男性肌纤维氧化能力评估中的可行性。 肥胖男性合成下降,过氧化氢产生速率增强。而较瘦男 磷代谢物,包括和磷酸肌酸 ,,进而 性单次高脂肪进食后线粒体过氧化氢产生速率急剧增高” 。 探究肌肉线粒体代谢。非稳定状态下,最大产生能力可 以上研究对探究胰岛素抵抗的潜在病因学以及其与线粒体生 通过简单肌肉运动消耗后的恢复动力学进行评估。恢复 物学、氧化剂产生和胰岛素作用的关联具有重要的价值。 速率常数与肌肉线粒体氧化能力成比例,可计算为静息骨骼 收稿日期:基金项目:国家自然科学基金 ;上海教委科技创新项目通讯作者:严惟力。 : ; :. 标记免疫分析与临床 年 月第 卷第 期 . 体内方法 . 体内方法 个体氧气消耗最大速率 :可通过接近极限运动 虽然线粒体偶联的体内测量技术难度较大,但仍可借助 独特的无创手段对该参数进行评估。方法之一是将 ?时的间接热量测定法估计 。虽然由线粒 和得到的信息整合,从而分别评估产量和耗氧 体呼吸作用部分决定,同时它也可受血液载氧能力、组织灌注 量 驯。采用偏最小二乘法分析和校准法可将血红素和肌 和心输出量等因素的影响。因此中枢血液动力学的影响使线 粒体呼吸作用耗氧更为复杂,而且使用整体间接热量测定法 红素从光谱中分辨出来,从而记录下含氧及脱氧的血红蛋白、 肌红蛋白以及氧化和还原的细胞色素