抑制差减杂交法研究复等位基因遗传的大白菜核雄性不育分子机制.pdfVIP

抑制差减杂交法研究复等位基因遗传的大白菜核雄性不育分子机制.pdf

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中国雇亏c丕握 2011,27(22):167—171 ChineseAgriculturalScienceBulletin 抑制差减杂交法研究复等位基因遗传的 大 白菜核雄性不育分子机制 冀瑞琴,宋 倩,辛喜凤,周 雪,冯 辉 (沈阳农业大学园艺学院,沈阳 110866) 摘 要:AB01是本课题组培育的复等位基因遗传的核雄性不育大白菜 甲型 “两用系”,目前已建立了 一 套该材料的应用技术体系,但其不育分子机制尚不明确。本研究以AB01的不育株和可育株为材 料,利用抑制差减杂交技术构建了正反抑制差减eDNA文库,并通过测序及生物信息学手段寻找育 性相关基因,以此来推断该材料的不育分子机制。研究共找到27个差异表达基因,其中25个基因 在NCBI数据库中均有同源序列,这些基因中7个与花发育相关,5个与脂类代谢相关,3个与活性氧 及能量代谢相关,3个与光合作用及叶绿体合成相关,其余7个为功能未知基因。由此推测复等位 基因遗传的核雄性不育大白菜不育的发生与脂类、能量代谢及光合作用有关。 关键词:大白菜 ;雄性不育;抑制差减杂交;分子机制 中图分类号:$634.1 文献标志码:A 论文编号:201l一0667 TheM olecular—mechanism ResearchofGenieMultiple—alleleInheritedM ale—sterileinChinese Cabbage(BrassicarapaL.ssp.chinensis)byUsingSuppressionSubtractiveHybridization JiRuiqin,SongQian,XinXifeng,ZhouXue,FengHui (CollegeofHorticulture,ShenyangAgriculturalUniversity,Shenyang110866) Abstract:AB01,thetwo-typelineofmultiple-alleleinheritedmale-sterileChinesecabbage(Brassica rapaL.ssp.chinensis)wasbredbyourresearchgroup,thetechnologysystemofthismaterialhadbeen build,butitssterilemolecularmechanism wasnotclearyet.Inthisresearch,sterilityandfertilitycDNA librariesincluding27differentiallyexpressedcloneswereconstructedusingthefertileandsterilebudsof AB01bythesuppressionsubtractivehybridization(SSH).AccordingtoBLASTscreeningandfunctional annotation,25 ESTswerehomologytoknown sequenceofthe databasesattheNationalCenterfor BiotechniealInformation(NCBI).The25genes,withhomoloygtoknownproteins,couldbedividedinto4 rgoups(7flowersdeveloping—relatedgenes,5lipidmetabolism,3eneryg metabolismgenes,3chloroplast relatedgenesand7encodetheunclassifiedproteins).Theresultssuggestedthemolecularmechanismof geniemultiple-alleleinheritedmale-sterileChinesecabbagewasrelatedwith lipidmetabolism,en

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