金毛狗叶总黄酮的提取及抗氧化性.pdfVIP

林燕如：金毛狗叶总黄酮的提取及抗氧化性 15min，取出测其吸光度D。(2)为探讨不同抗氧化剂对羟 自 的PBS缓冲液5．0mL，再分别加入2mg／mL柠檬酸溶液和金 由基的清除效率，分别取2mg／mL柠檬酸溶液和金毛狗叶提 毛狗叶提取物0．20mL，各加入2mmol／mL邻苯三酚1mL，再 取物0．20mL，用蒸馏水定容至 10mL，摇匀，37℃水浴中继续 加入一定量缓冲溶液使体系总体积达到9mL，然后立即混 恒温15min，取出测其吸光度D。以柠檬酸对 ·OH清除率作 匀 ，以二次蒸馏水作参比，在322nm下测定吸光值 D， (每 对比进行分析，则待测液对 ·OH的清除率计算公式为： 隔30s测 1次直至反应启动后 6rain)，以时间为横坐标， n 一 ，) ^oo／】褂釜 为纵坐标进行线性回归，得到的直线斜率为反应速率 · 0H清除率 = ×100％ 上，0 和 。以柠檬酸对of的清除率作对比进行分析，超氧阴 1．2．3．3 金毛狗 叶总黄酮对超氧阴离子 (0 )的清除 离子(of)的清除率计算公式为： 试验 1．2．3．3．1 不同添加量金毛狗叶黄酮提取物对超氧阴离子 0 清除率= ×100％ 空 的清除效果 在室温下往 6根 25mL比色管中加入 pH值 2 结果与分析 8．34、浓度 66．7mn~l／L的PBS缓冲液 5．0mL，再各加入 2mg／mL金毛狗叶提取物0、0．20、0．40、0．60、0．80、1．O0mL 2．1 各因素对金毛狗叶黄酮类化合物提取率的影响 (不加金毛狗叶提取物的为空白对照)，各加入2mmol／mL邻 2．1．1 乙醇浓度 由图1可知，在乙醇浓度不同、其他条件 苯三酚 1mL，再加入一定量缓冲溶液使体系总体积达到 相同(微波时间5min、微波功率 160w、60℃恒温水浴 9mL，然后立即混匀，再以二次蒸馏水作参比，在322nm下测 0．5h、料液比1g：40mL)的情况下 ，开始时金毛狗叶总黄酮 定吸光度 趋 (每隔30s测1次直至反应启动后6rain)，以 提取率随着乙醇浓度的增大逐渐提高，但当乙醇浓度大于 时间为横坐标，D 为纵坐标进行线性 回归，得到的直线斜 5O％时，提取率却降低。这可能是因为高浓度乙醇使细胞内 率为反应速率 和 。 蛋白质凝固，黄酮不易溶出 ，同时一些非黄酮类干扰物质 1．2．3．3．2 不同抗氧化剂对超氧阴离子的清除效果 在室温 增多，造成总黄酮提取率下降。故选择乙醇浓度 4o％、50％、 下往2根25mL比色管中加入pH值8．34、浓度66．7mmol／L 60％进行正交试验。 3．O 3·2 ^ 褂 2．5 荨s．o 鬟2．