116个小麦品种（系）抗叶锈基因Lr9-Lr26、Lr19-Lr20的复合PCR检测.pdfVIP

i氩绚镳如 2012，38(2)：29—36 PlantProtection 116个小麦品种 (系)抗叶锈基因Lr9-Lr26、 Lrl9-Lr20的复合 砌 检测 任晓利 ， 刘太 国 ， 刘 博 ， 高 利， 陈万权 (中国农业科学院植物保护研究所 ，植物病虫害生物学国家重点实验室 ，北京 100193) 摘要 [目的]建立简单、快速、有效的小麦抗叶锈基 因复合 PCR体系，从而提高分子标记辅助选择效率。[方法] 以28个 T‘hatcher’为背景的近等基 因系和 l6个 已知基 因载体 品系作为试材 ，测试 了小麦抗叶锈病基 因Lr9、Lr26、 Lrl9和 Lr20的STS标记特异性 ，通过优化PCR反应体系和循环条件，构建 了抗叶锈基因Lr9一Lr26和 Lrl9一Lr20 的复合PCR检测体系。对 116个小麦品种(系)所含有的抗叶锈病基因进行了分子检测。[结果]供试品种均不含 有Lr9和 Lr20，47个品种含有Lr26(基 因频率为 4O．5 )，‘中梁22’含有Lrl9。经反复验证，Lr9Lr26和Lrl9一 Lr20复合PCR技术检测结果可靠，且与上述单个分子标记检测结果一致。[结ee]建立的Lr9一Lr26和Lrl9一Lr20 的复合 PCR检测体系可 以准确、稳定、高效地检测小麦抗叶锈基 因Lr9、Lr26、Lrl9和 Lr20。 关键词 小麦叶锈病 ； 分子检测 ； 复合 PCR； Lr9Lr26； Lrl9Lr20 中图分类号： S435．121．43，S432．21 文献标识码 ： A DOI： 10．3969／j．issn．0529—1542．2012．02．006 MultiplexPCR assayfordetectionofwheatleafrustresistancegenes Lr9．Lr26andLrl9．Lr20 in 116Chinesewheatcultivars(1ines) RenXiaoli， LiuTaiguo， LiuBo， GaoLi， ChenW anquan (StateKeyLaboratoryforBiologyofPlantDiseasesandInsectPests，InstituteofPlantProtection， ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Beijing 100193，China) Abstract ~Objective]Asimple，fastandeffectivemethodofmultiplexPCRforwheatleafrustresistancegenes wassetuptoimprovetheefficiencyofmarker—assistedselection．[Method]BytestingthespecificityofSTSmark— ersofLr9，Lrl9，Lr20andLr26basedonthenearisogeniclineswith T‘hacher’backgroundandknowngenelines， multiplexPCR wasdevelopedandoptimizedfordetectionofwheatleafrustresistancegenecombinationofLr9Lr26 andLrl9一Lr20．[Result]Atotalof116wheatcultivarswereevaluatedusingthemultiplexPCRs，andspecificDNA bandsofresistancegeneLr26waspresentin 47accessionsoutofthe116cultivarsorlinestested．Lr9andLrSO werenotdetectedandLr19maybepresentin Z‘hongIiang22’．TheLr9Lr26andLrl9一Lr20multiplexPCR r