DLK1调控Notch信号通路对急性T淋巴细胞白血病细胞的影响.pdfVIP

·586 · 自血病 ·淋巴瘤2013 箜 鲞第 10期 JournalofLeukemia＆Lymphoma，October2013，Vo1．22，No．10 · 论 著 · DLK1调控Notch信号通路对急性T淋巴细胞 白血病细胞的影响 卫晓华 康建民 李参 张建华 黄灿 侯丽虹 【摘要 】 目的 检测外源性 DLK1蛋白作用后急性T淋巴细胞白血病 (T-ALL)细胞株CCRF—CEM (简称CEM)细胞的增殖情况及Notch信号通路下游靶基因的表达水平，探讨 DLK1对 CEM细胞中 Notch信号通路的作用。方法 采用 CCK一8法检测不同浓度 (0．5、1．0、1．5Ixg／m1)DLK1蛋 白作用后 ，不 同时间点(24、48、72h)CEM细胞的增殖情况；采用实时荧光定量一PCR法检测 DLKI蛋 白作用后不同 时间点 (24、48、72h)CEM细胞中Notch信号通路的Notchl受体及其下游靶基因的mRNA表达水平。 结果 DLK1蛋白促进 CEM细胞增殖，与对照组相比差异具有统计学意义 (P0．05)，其中不同蛋白浓 度在 72h的增殖率分别为0．14±0．03、0．17±0．04、0．55±0．01。DLK1蛋白引起Notch信号通路的Notchl 受体及其下游靶基因HES1、c—myc、NF一-cB表达上调，与对照组相 比差异具有统计学意义，其中靶基因 HES1在 72h、c—myc在 48h、NFKB在 72h的相对表达量分别为 3．2551±0．3100、1．6086±0．0941、 2．0515±0．3453。结论 外源性 DLK1通过上调 Notch信号通路的Notch1受体及其下游靶基因HES1、 c—myc、NF—KB的表达，促进 T—ALL细胞株 CEM细胞增殖。 【关键词】 配体；信号通路； 白血病；靶基因 DLK1affectsT cellacutelymphoblasticleukemiacellsbyregulatingNotchpathway Xiao—hua, KANGJian—min，LICan，zHANGJian—hua,HUANGCan，HoULi—hong．DepartmentofHematology，the SecondA佩liatedHospitalofShanxtMedicalUniversity,Taiyuano3oO01，China Correspondingauthor：H0ULi—honk EmaiZhoulihon~602 otm~1．com A【bstract】 Objective Todetecttheproliferationandtheexpressionlevelsofdownstream target genesofNotchpathwayofT—ALLCCRF—CEM fCEM)celllinetreatedwithexogenousDLK1protein，inorder toinvestigate’theeffectsofDLK1proteinontheNotchpathwayinCEM cells．M ethods CCK一8assaywas performedtoexaminetheproliferationofCCRF—CEM cells，whichweretreatedwithvariousconcentrationf0．5． 1．O，1．5I~g／m1)DLK1forvarioustime(24，48，72h)．RFQ—PCRwasappliedtoassessthemRNAexpression levelofNotchlreceptoranddownstream targetgenesofNotchpathway inCEM cells． whichweretreatedfor varioustimef24，48，72h)．Results DLK1proteinstimulatedtheproliferationofCCRF—CEM ceils，andthe proliferationrateswithdifferentconcentrationsofDLK1were0．14~0．03． 0．17±0．04． 0．55_+0．O1in72hours． respectively． therewerest