小鼠体内外受精植入前胚胎全基因组甲基化模式比较.pdf.pdfVIP

四川动物 2012年 第31卷 第3期 SichuanJournalofZoology Vo1．31 No．3 2012 DOI：10．3969／j．issn．1000—7083．2012．03．009 小鼠体 内外受精植入前胚胎全基 因组甲基化模式比较 杨甸甸 ，尚明保 ，吴风瑞 ，刘勇 ，丁彪 ，王荣 ，李文雍 (1．安徽大学生命科学学院，合肥230039；2．胚胎发育与生殖调节安徽省重点实验室，安徽阜阳236041； 3．阜阳师范学院生命科学学院，安徽阜阳236401) 摘要：为考察体外受精、操作及培养环境对体外受精的小鼠植入前胚胎全基因组 DNA甲基化模式的影响，本研 究以体内受精的植入前胚胎作为对照，采用间接免疫荧光法检测小鼠体内外受精植入前胚胎基因组 DNA甲基化模 式。实验结果表明，体外受精各期植入前胚胎呈现出与之相应时期的体内受精植入前胚胎不同的DNA甲基化模式 和水平 ，原核期甲基化水平较高，2-,4-、8-细胞期明显降低，而桑葚胚和囊胚期又略有升高。各期体外受精植入前胚 胎的基因组 DNA甲基化水平都比同时期体内受精胚胎的甲基化水平低。本实验结果部分显示了体外受精、操作及 培养环境可能对正常的DNA甲基化模式产生影响，造成体外受精植入前胚胎甲基化模式异常。 关键词：小鼠；甲基化 ；体内外受精 ；植入前胚胎 ；抗5-甲基胞嘧啶抗体 中图分类号：Q95—33；Q132．7 文献标识码：A 文章编号 ：1000—7083(2012)03—0378—05 ComparisonofGenomic-wideMethylationPatternsin invivoandinvitroFertilization M ousePreimplantationEmbryos YANG Xun．xun ，SHANGMing—bao，WU Feng．rui ，LIU Yong2 DINGBiao ，WANG Rong ，LIWen．yong2 ， (1．CollegeofLifeScience，AnhuiUniversity，Hefei230039，China；2．KeyLaboratoryofEmbryoDevelopment andReproductiveRegulationinAnhuiProvince，Fuyang，AnhuiProvince236041，China；3．CollegeofLifeScience， FuyangNormalUniversity，Fuyang，AnhuiProvince236041，China) Abstract：Inordertoinvestigatetheinfluencesofinvitrofertilization，operationandcultureenvironmentonmouseIVF preimplantationembryos，theDNA methylationpatternsofinvivofertilizationandIVFmousepreimplantationembryoswere investigatedbyimmunofluorescencestainingwithanantibodyagainst5-methylcytosine(5-MeC)．Usinginvivofertilized preimplantationembryosasthecontrol，weexaminedgenomic—wideDNAmethylationpatternsofinvivofertilizationandIVF mousepreimplantationembryos．TheresultshowedthatIVFmousepreimplantationembryospresentdifferentgenomic—wide DNA methylationpattern compa