miR-98前体转染卵巢癌细胞的效率检测及增殖抑制检测.pdfVIP

凑州医学院学报 2011年6月第34卷第 3期 BMUJournal，Jun．2011，Vo1．34，No．3 miR08前体转染卵巢癌细胞的效率检测及增殖抑制检测 王甜甜 霍冠华 滨州医学院组织学与胚胎学教研室 烟台市 264003 【摘要】 目的 pre-hsa-miR08转染卵巢癌SKOV3、H08910和A2780细胞，观察转染率并研究转染后对卵巢癌细胞的增殖抑 制作用，为卵巢癌新治疗方法研究提供实验依据。方法 利用构建的pre-hsa-miR08质粒HmiR和连接随机序列的质粒CmiR 转染人卵巢癌细胞SKOV3、H08910和A2780细胞，荧光显微镜观察和流式细胞仪计数计算转染率，MTr法检测转染对卵巢癌 细胞的增殖抑制作用。结果 HmiR转染后24h，荧光显微镜下观察，SKOV3、H08910、A2780细胞 的转染率分别为61．50％、 68．59％、63．40％；流式细胞术计数，转染HmiR后 SKOV3、HO8910、A2780细胞的转染率分别为 57．93％、66．73％、58．59％。 转染HmiR后，MrI’r法检测SKOV3、H08910、A2780细胞的增殖抑制率随转染时间延长而增加，72h达到49．54％、53．25％、 46．09％。结论 三种卵巢癌细胞的转染率均接近或超过60％，HmiR转染后可抑制卵巢癌细胞增殖，其抑制作用随转染时间 延长而增强。 【关键词】 微小RNA98；卵巢癌细胞；转染率；增殖抑制 【中图分类号J R392．1 【文献标志码】A 【文章编号】 1001-9510(2011)03-0164-06 TransfectionefficiencyofmiRO8precursorandproliferationinhibitoryeffectoncellprollferationinovariancancercelllines WANG Tiantian HUOGuanhua DepartmentofHistologyandEmbryology，BinzhouMedicalUniversity，Yantai264003 A【bstract】 Objective Thepre-hsa-miR08wastransfectedintoovariancancerSKOV3，HO8910andA2780cells，andtoinvesti— gatethetransfectionefficiencyandproliferationinhibition，inhoppingofprovidingexperimentalevidencefortreatingovarian malig． nanees．Me~ods Thepre-hsa-miR-98plasmidHmiRandplasmidCmiR，from acontrolvector，weretransfeetedintohumanovarian cancercelllinesSKOV3，H08910andA2780．Transfectionefficiencywasinvestigatedbyfluorescencemicroscopyandflow cytometry ， andtheproliferationinhibitioninthecelllinesweretestedbyMT／assay．Results Aftertransfected24hours，theratesoftransfection inSKOV3，H08910，A2780cellsbyfluorescencemicroscopywere61．50％ ，68．59％ ，and63．40％ ．Thetransfectionratesbyflow cy· tometrywere57．93％ ，66．73％ ，58．59％ respectively．TheratesofproliferationinhibitioninthecellsafterHmiR transfect