Pax3基因无义突变导致Wbct小鼠显性白斑形成.pdfVIP

江苏农业学报 (Jiangsu ofAgr．Sci．)，2008，24(6)：857～861 857 Pax3基 因无义突变导致 Wbct小鼠显性 白斑形成 徐向明 ， 王 琳 ， 翟国勤 ， 龚 文 ， 华 峥 ， 陈 兵 ， 薛整风 (1．江苏畜牧兽医职业技术学院，江苏 泰州 225300；2．扬州大学比较医学中心，江苏 扬州 225009) 摘要： 本研究将 Wbct杂合子小鼠与背景品系小鼠C57BIM6(B6)配种，记录后代白斑小鼠与正常小鼠数 目， 采用卡方检验确定遗传模式。在突变基因初步定位基础上增加样品数及微卫星标记数 目对突变基因进行精确定 位，确定候选基因。采用PCR扩增后直接测序方法对候选基因Pax3进行序列分析。结果表明：Wbct突变呈单基因 显性遗传，但在不同遗传背景中自斑表型存在差异；Wbct突变纯合子致死 ；Pax3基因编码区第88位密码子由UGC 变为终止密码子 UGA，导致蛋白编码提前终止，是引起 白斑突变表型的原因。 关键词： Wbct；Pax3；基因；无义突变 ；白斑；小鼠 中图分类号： Q754 文献标识码： A 文章编号 ：2008)06—0857-05 DominantSpottingPhenotypeResultedfrom aNonsenseM utation ofPax3 in W ctmouse XU Xiang—ming ， WANG Lin。 ZHAIGuo．qin ， GONGWen ， HUA Zheng2 CHEN Bing2 XUE Zheng—feng2 ， ， ， (1．JiangsuCollegeofAnimalHusbandry＆Veterinary，Taizhou225300，China；2．ComparativeMedicineCenter，YangzhouUniversity，Yangzhou225009 China) Abstract： Tostudythehereditypatternandidentifythemutationgeneofakindofwhitespotmouse(namedWbct) obtainedbyethylnitrosourea(ENU)mutagenesis，WbctheterozygousmicewerematedwithnormalC57BL／6(B6)mice． TheiroffspringwithnormalormutationphenotypewereregisteredrespectivelyandX testwasusedtoconfirm theheredity pattern．Finemappingwasconductedbyincreasing[(B6×D2)×B6]N2miceDNAsampleandmicrosatellitemarkers． Basedonfinemapping，thecandidategenePax3wasfound．Pax3genefrom WbctheterozygotewasamplifiedbyPCRfol— lowedbysequencing．Hereditytestindicatedthatthewhitespotphenotypewascontrolledbyasingledominantgenewith 100％ penetrancebutwasaffectedbygeneticbackground．Thehomozygousmicecouldnotsurvive．A C—to—A transversion atthe264thnucleotidein WbctORFintroducedapre--terminationcodonofaminoacidandcausedthephenotypeofdomi-· nantwhitespot． Keywords： Wbct；Pax3gene；nonsensemutation；whitespot；mouse 进行基因功能分析的策略可分为基因驱动法和