形态标记与RAPD标记在青蒿种质资源分类中的应用.pdfVIP

一 76一 江苏农业科学 2008年第6期 形态标记与 RAPD标记在青蒿种质资源分类中的应用 蒋向辉 ，余朝文 ，谷合勇 ，李 丹 (1．怀化学院生物工程系，湖南怀化418008；2．怀化市生物育种与加工技术实验室，湖南怀化418008) 摘要：采用形态学标记和RAPD分子标记，对 l5份青蒿种质资源材料进行了遗传多样性分析，结果表明：株高、茎粗、茎色、夹角、 节间距等形态指标适合于青蒿植物学性状观察记载；RAPD分子标记在供试材料中多态位点多，有效等位基因频率高，因此也适用于 青蒿种质资源的鉴定。综合运用两种方法对青蒿种质资源材料进行区分鉴定切实可行，其准确率与所选用的标记种类和数量有关。 关键词：形态标记；RAPD标记 ；青蒿；种质资源；分类 中图分类号：Q944．1 文献标志码：A 文章编号：1002—1302(2008)06—0076一o3 中药青蒿，即黄花蒿 (Armm~ia肌n抛 L．)，又名臭蒿、臭 织特异性和发育阶段性 ；分子标记类型多、数量大，不受环 青蒿，为菊科蒿属一年生草本植物。从青蒿中提取的青蒿素 境影响，准确率高，但应用成本高，受实验条件限制，田间无法 及其衍生物是继喹啉类和吖啶类之后 的一类新的抗疟药 操作。因此，采用多种标记综合应用手段，可以提高种资鉴定 物…，临床上还用蒿甲醚、青蒿琥酯预防和治疗血吸虫病 ，二 的准确性与鉴定效率。郑丽屏等对 lO份青蒿种质材料进行 氢青蒿素、蒿甲醚用于治疗与艾滋病相关的弓形虫病已取得 RAPD分析发现 J，青蒿具有明显的遗传分化，其遗传分化与 了很好的临床效果 J。近年来由于需求量越来越大，野生青 青蒿素的变化及地理分布有一定的相关性，青蒿素含量高的 蒿资源 日益枯竭，研究结果显示，除我国重庆东部 、福建、云 青蒿与其他地区的青蒿在形态上有一定区别。本研究对 15 南、广西、湖南西部、海南部分地区外，世界绝大多数地区的青 份青蒿种质材料，采用形态标记和 RAPD分子标记综合应用 蒿中青蒿素含量低于0．2％，没有利用价值 ，因此对青蒿的 手段进行聚类分析 ，以筛选和确立适合于青蒿种质资源分类 分类与鉴定犹为重要。 与鉴定的形态标记和RAPD分子标记，为青蒿的品质改良和 当前应用于物种鉴定与分类的标记有形态标记 、同工酶 良种选育奠定基础。 标记和分子标记等多种标记，但各种标记在运用中各有优劣， 1 材料与方法 如形态标记简单易行，可操作性强，但费时、费工，易受外部环 境影响，准确率较低。同工酶标记可以弥补形态标记应用上 1．1 供试材料 的某些局限性 ，但因同工酶是基因表达加工后的产物，具有组 供试青蒿种质材料 15份，来源不同地区(表 1)。 表 1 青蒿种质材料来源 编号 种质来源 生态环境 编号 种质来源 生态环境 编号 种质来源 生态环境 1 湖南怀化 (HH) 河边 6 湖北襄樊(HX) 沟谷 Il 广西柳州 (GL) 荒地 2 四川酉阳(SY) 荒地 7 江西萍乡(JP) 路旁 l2 贵州铜仁 (GT) 河边 3 湖南吉首(HJ) 林缘 8 四川绵阳(SM) 林缘 l3 贵州贵阳(GG) 林缘 4 湖南益阳(HY) 林缘 9 云南昆明(YK) 路旁 14 河南信阳(HX) 河边 5 湖南长沙(HC) 路旁 10 云南大理(YD) 山坡 l5 重庆 (CQ) 林缘 1．2 试 验 方 法 1．2．2．1 DNA提取与PC