纳米金对PCR扩增效率影响的机制探讨.pdfVIP

第20卷第4期 激 光 生 物 学 报 Vo1．20 No．4 2011年 8月 ACTA LASER B10LOGY SINICA Aug．20I1 doi：10．3969／j．issn．1007—7146．2011．04．001 纳米金对 PCR扩增效率影响的机制探讨 李或嫒 ，章春笋 (华南师范大学激光生命科学教育部重点实验室暨激光生命科学研究所，广东广 摘 要 ：近年来，纳米金粒子对聚合酶链式反应(polymerasechainreaction，PCR)的增效作用倍受关注，但是其 具体的机制仍未明确提出。研究发现在 PCR反应中，纳米粒子的增效作用是存在最佳浓度的，增加 DNA聚合 酶或者小牛血清蛋白(BSA)可以消除纳米金粒子导致的抑制。我们认为，纳米金粒子可能起到了类似于聚合酶 B亚基的作用，提高了DNA聚合酶的延伸能力 ；而过量纳米金对 PCR的抑制作用可能与纳米金结合单链 DNA 产生的位阻效应有关。 关键词 ：PCR；纳米金粒子；DNA聚合酶；机制 中图分类号 ：O614．123；Q78 文献标识码 ：A 文章编号 ：1007—7146(2011)04-0427-07 M echanism oftheEffectsofGoldNan0particlesonPolymerase Chain ReactionEffi ciency LIYuyuan，ZHANG Chunsun (MOEKeyLaboratoryofLaserLifeScience＆ InstituteofLaserLifeScience，SouthChina NormalUniversity，Guangzhou510631，Guangdong，China) Abstract：Goldnanoparticles(AuNPs)havebeenfoundtogreatlyenhancethepolymerasechainreaction(PCR)effi— ciency inrecentstudies．However，theunderlyingmechanism isstillunclear，thoughseveralhypotheseshavebeenpro— posedinpreviousstudies．ItwasfoundthatAuNPsenhancedthePCR efficiencyinaconcentration—dependentmanner． However，theadditionofDNApolymeraseorbovineserumalbumin (BSA)couldeliminatetheinhibitoryeffectsofex— cessAuNPs．BasedOiltheseresultsweproposeapossiblemechanism thatAuNPsmightinteractwithp01ymeraseina manneranalogousto~-slidingclamptomodulatetheactivityofpolymeraseandimprovePCRamplification；whiletheex— eessAuNPsbindingtossDNA toproduceastericeffectmightinhibitamplificationefficiency． Keywords：polymerasechainreaction(PCR)；goldnanoparticle(AuNPs)；DNApolymerase；mechanism 聚合 酶链 式 反应 (polymerasechainreaction， 术的实质是在体外酶促作用下合成特异性 的DNA PCR)…是一种体外快速扩增 DNA的技术，这种技