免疫组化在同一张玻片上做2种免疫抗体检测.pdfVIP

· 1408 · 浙江』临床医学2010年 l2月第 12卷第 】2期 免疫组化在同一张玻片上 做2种免疫抗体检测 孟 丽 陶丹华 潘秀兰 免疫组化 目前在病理诊断和科研1作 中应用 问，一般不超过 1min)。自来水冲洗或PBS(做免 十分普遍 ，耗材量也很大。为了减少试剂材料消 疫组化用过的)返蓝，酒精脱水，二甲苯透明，中性 耗、节省时间、提高工作效率，作者在实际工作中， 树胶封片，显微镜观察 。 对免疫组化操作尝试在 同一张玻片上做 2种免疫 2 结果 抗体的检测，效果满意。 免疫组化在同一张玻片上做 2种免疫抗体检 l 材料及方法 测，811例所有标本阳性细胞定位准确，背景清晰， 1．1 材料 采取本院2010年 3月作免疫组化病 非特异性着色少见 ，且无交叉反应。如图1、2。 例 811例，其中乳腺癌 】00例、肺癌24例、子宫良 性肿瘤600例、前列腺等泌尿系统病变24例，其余 为子宫内膜病变。所用试剂来 自迈新生物试剂有 限公司，同时采用迈新的MaxVision检测系统。 1．2 方法 标本经 10％福尔马林固定，常规脱 一 一 水，石蜡包埋，切片厚度3Ixm。切片时在磨砂标签 图 1 CK20(胸水 ：腺癌) 预留处标记好抗体名称 ，把相同预处理要求的2种 抗体名称标记于同一玻片上，中问用／号隔开。取 3 讨论 片时，分左右在同一玻片上置2片组织切片 (玻片 免疫组织化学又称免疫细胞化学 ，是利用抗 事先经 APES胶处理)，中间视组织块大小留有适 原与抗体问的特异性结合原理和特殊标记技术， 当距离。切片常规烤片 60％，4～6h。脱蜡至水， 对组织和细胞 内的特定抗原或抗体进行定位、定 蒸馏水稍洗。用 3．3％甲醇双氧水阻断过氧化物 性或定量检测的一 门技术…。在病理实际工作 酶 10min，蒸馏水洗2次，每次3rain，视不同抗体预 中，免疫组化技术作为一种常规应用于外科病理 处理要求分别进行酶消化、柠檬酸及EDTA高压抗 诊断和科研工作 已十分普遍 ，尤其在 胃肠道原发 原修复等相应处理。再用蒸馏水洗 2次，3rain， 性恶性淋巴瘤与 胃癌等相关恶性肿瘤 的鉴别诊断 PBS洗 2次 ，3min(PBS每 200ml加曲拉通 X一100 中，免疫组化不仅可 以提高确诊率，而且可以分辨 1滴。下同)。用 PAP笔在距离组织周围3～4mm 出组织细胞来源 ，给临床治疗提供有效的参考数 处划圈，每块组织加相应一抗 501xl，室温孵 育 据 。然而 ，随着工作量的增大 ，原材料 的消耗也 60min。PBS洗 3次，每次 5rain。甩干并用纸 巾擦 相应增多。陈天水 报道在一张玻片上对组织进 干组织边缘多余液体，每块组织加即用型MaxVi— 行不同的特殊染色方法。孙桂勤等 报道在同一 sion 抗 鼠／兔聚合物二抗 50p~l，室温孵育 15min。 玻片上做 2种 以上抗体检测。把2种抗体放在 同 PBS洗3次，每次3rain，DAB显色3～5rain，显微镜 一 玻片上检测 ，作者通过实践，认为不仅节省 了材 下观察。自来水洗，Marry’S苏木素复染30s(视苏 料耗费，且可将有对 比的抗体放在同一玻片上，如 木素使用时间长短及室温高低而相应延长染色时 CK7和 CK20、CKH和 CKL、ER和 PR，以及前列腺