番茄“美粉1号”子叶再生体系的建立.pdfVIP

一 60一 江苏农业科学 2011年第39卷第3期 李立芹．番茄 “美粉 1号”子叶再生体系的建立[J]．江苏农业科学，2011，39(3)：60—62 番茄 “美粉 1号”子叶再生体系的建立 李立芹 (1．四川农业大学农学院，四川雅安625014；2．植物生理学与生物化学国家重点实验室，北京 100094) 摘要：以番茄品种美粉 1号为试验材料，研究20％次氯酸钠和0．1％氯化汞处理不同时间对番茄种子表面消毒 和萌发的影响，同时研究不同的激素组合对该品种再生芽形成和生根的影响。结果表明，用20％次氯酸钠对番茄种 子消毒20min，可获得较多的无菌苗；同时发现，IAA浓度为0．2mg／L和6一BA浓度为2mg／L组合时，外植体再生芽 频率较高，为85．2％，促进不定芽生根的最佳激素浓度为MS培养基中添加0．5mg／LIAA。再生苗移栽到灭菌处理后 的土壤中后成活率较高，可达92％。 关键词：番茄；子叶；再生 中图分类号：$641．204 ．3 文献标志码：A 文章编号：1002—1302(2011)03—0060—03 番茄(LycopersiconesculentumMil1)是茄科番茄属的一年 1mg／L，分别与0．1、0．2、0．5mg／L的IAA和NAA组合；IAA 生或多年生双子叶植物，因其果实营养丰富，加工方便，已是 固定为0．2mg／L，分别与0．5、1、2mg／I的6一BA和ZT组 全世界栽培最为普遍的果菜之一…。近年来随植物转基因 合。培养基经0．1MPa高压灭菌20min后进行分装。每瓶 技术影响的日益扩大，番茄因其遗传和生理研究的优势，已成 外植体接种数不少于30片子叶，每个处理重复3次。外植体 为基因工程领域重要的模式植物。众所周知，建立高效的再 接种后 ，直接放在光下培养，培养条件同上。40d后统计不 生体系是基因遗传转化的基础，目前关于番茄再生体系的报 定芽的诱导率。出愈率=(诱导愈伤组织外植体数／接种外 道虽然很多，但依然存在基因型依赖性、再生效率低、生根困 植体数)×100％；不定芽的分化率=(分化不定芽的外植体 难和幼苗存活率低等问题 ，需要对每个特定的品种建立 数／接种外植体数)×100％。 一 套高效再生系统 。美粉 1号是近年培育的番茄新品 1．4 生根培养基的筛选与幼苗移栽 种，属于大果型粉红果，耐低温，坐果力强，产量高，不易裂果， 将 1～2cm带2—3张叶片、生长健壮的再生芽苗，从外 耐储运，商品性好 ，抗病力强，适应性广，但其再生体系未见报 植体基部剥离，插入不同生根培养基中，20d后统计生根数 ， 道。本试验对其无菌苗的获得、子叶再生体系进行了系统的 同时观察根的形态。生根率 =(生根幼芽数／接种幼芽数)× 研究和分析，为优良外源基因导人该品种奠定基础。 100％。待生根小苗长至8cm左右时，将培养瓶的瓶口打开， 加水少许，炼苗3d后取出，洗去根部培养基残渣，将幼苗移 1 材料与方法 栽至经高温灭菌的营养土中，盖塑料薄膜保湿，在25～27℃ 1．1 试验材料 条件下光照培养。待小苗有新叶长出时，可去掉塑料薄膜。 番茄美粉 1号的种子购 自中国农业大学博通农艺科技 2 结果与分析 中心。 1．2 无菌苗的准备 2．1 不同消毒方法对番茄种子萌发的影响 番茄种子用蒸馏水浸泡24h后 ，用0．1％氯化汞和20％ 将番茄种子用20％次氯酸钠和0．1％氯化汞溶液分别消 次氯酸钠溶液进行消毒，无菌水冲洗5次，并用无菌吸水纸略 毒 l0、20、30min，用无菌水冲洗后接种到MS培养基上，黑暗培