HPLC测定饲料源小肽产品中赖氨酸含量.pdfVIP

HPLC测定饲料源小肽产品中赖氨酸含量.pdf

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78 《乳业科学与技术》 2009年第2期 (总第 135期) HPLC测定饲料源小肽产品中赖氨酸含量 黄建国,高学军,佟慧丽,刘晓飞 (东北农业大学乳品科学教育部重点实验室,黑龙江哈尔滨 150030) 摘 要:将蛋 白饲料源小肽产品按照GB/T 18246—2000中酸水解法进行水解及相应的处理,获得氨基 酸混合液与 2,4一二硝基氯苯(CDNB)衍生化反应后,其中赖氨酸生成二硝基氯苯赖氨酸(DNP—LYS),经 日本岛津SPD一10AVG高效液相色谱 (HPLC),C18柱分离,UV350nm检测,衍生后氨基酸混合物得到 较好的分离,赖氨酸最低检 出量 2 g。 关键词:小肽产品;赖氨酸;高效液相色谱 中图分类号:TS252.1 文献标识码 :A 文章编号:1671—5187(2009)02—0078—03 TheDetermination ofLysine Contentin SmallPeptidesProducts from Feed Protein Sourceby HPLC HuangJianguo,GaoXuejun,DengHuili,LiuXiaofei (KeyLaboratoryofDairy ScienceofMinistry ofEducationofChina,NortheastAgriculturalUniversity, HarbinofHeilongjiang150030,P.R.China) Abstract:Smallpeptidesproductsfrom feed protein sourcehadbeenmadetohydrolyzeand dealac— cordingtotheacidhydrolysismethod of GB/T 18246-2000,and intermixtureofaminoacid wasob- tained obtainedintermixtureofaminoacidwasmixedwith 2,4一dinitrochlorobenzene (30mg/mL)to progresschemicalreaction,Lysinebelong to intermixture ofamino acid became dinitrochlorobenzene- Lysine;Finally,weusedhighperformanceliquidchromatography(HPLC)ofJanpanSPD-10AVG,C18 column to separate,UV350 nm detection,intermixture ofamino acid ramification could be preferable separated,lysine’Sminimum detectableamount2txg. Keywords:smallpeptidesproducts;lysine;highperformance liquidchromatography 饲料源小肽产品是经反刍动物常用蛋 白饲 酸的含量,提高分析检测的灵敏度和各氨基酸之 料经蛋白酶酶解获得的含2-3肽为主 (分子质量 间的分离特性 ,并且为其他饲料中赖氨酸的检测 小于 1000Da)的产品总称。其中,赖氨酸(LYS)含 提供有效的检测方法。 量是决定小肽产品质量的关键指标之一[“。目前, 赖氨酸的检测方法较多,液相色谱在赖氨酸含量 1材料与方法 测定上的应用越来越广泛l2I,HPLC可以对氨基酸 1.1仪器与试剂 直接定量测定fI,但是利用高效液相色谱检测饲 1.1.1仪器 料源蛋 白小肽产品中赖氨酸的含量 国内外 尚未 日本岛津SPD一10AV高效液相色谱仪,c18 见报道,本实验通过高效液相色谱 (HPLC)以 不锈钢分离柱 YMC (5 m4.6x150mm),DZF一 2,4一二硝基氯苯 (CDNB)I4l作为

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