高山红景天同源四倍体诱导与鉴定研究.pdfVIP

中草焉 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第 42卷 第6期 2011年 6月 ·1201· 高山红景天同源四倍体诱导与鉴定研究 刘剑锋 ，程云清 ，刘建华 ，钟 雪 ，陈智文 1．吉林师范大学 生态环境研究所，吉林 四平 136000 2．武汉科技大学附属天佑医院，湖北 武汉 430081 摘 要：目的 获得高山红景天同源四倍体无性体系。方法 秋水仙素诱导种子加倍，通过多次组培再生进行嵌合体分离， 采用气孔大小与密度测量、染色体计数和流式细胞学分析进行倍性鉴定。结果 秋水仙素质量分数与处理时间对种子萌发率、 幼苗死亡率及诱变率均有十分明显的影响，0．2％秋水仙素处理露 白种子 72h的萌发率、幼苗死亡率及诱变率分别为 18．2％、 73．6％、68．7％；倍性变异植株气孔明显增大，气孑L密度变小；正常二倍体染色体数 目为 2n=2x=26，四倍体染色体数为 2n=4x=52，发现非整倍体的存在；倍性变异植株经 3次再生纯化后获得纯合四倍体无性系，流式细胞学检测无嵌合体存在。 结论 秋水仙素处理高山红景天种子获得同源四倍体具有可行性。 关键词：高山红景天；秋水仙素；二倍体；四倍体；染色体 中图分类号：R282．2 文献标志码：A 文章编号：0253—2670(2011)06．1201．05 AutOtetraplOidinductionandidentificationofRhodiolasachalinensis LIU Jian—feng，CHENGYun—qing，LIU Jian．hua，ZHONG Xue，CHEN Zhi．wen 1．InstituteofEco—environmentalSciences，JilinNormalUniversity,Siping136000，China 2．AffiliatedTianyouHospital，WuhanUniversityofScienceandTechnology,Wuhan430081，China Abstract：0bjective ToobtainautotetraploidclonesofRho 0lasachalinensis．Methods Germplasmwithdoubledchromosomes wasacquiredaccordingtocolchicinesoakingseeds，andploidywasidentifiedaccordingtostomatasizeanddensiyt measurements， chromosomecountingandflow cytometryanalysis．Chimerawaspurifiedafterseveraltimesofregenerations．Results Colchicine concentrationandtreatmentdurationhadsignificanteffectonseedgemr inationrate，seedlingdeathrateandploidymutationrates，and meywere18．2％，73．6％，and68．7％，respectivelyaftertheseedsweresoakedin0．2％colchicinesolutionfor72h．Stomatadiameter waspromotedanddensiytwasdeclinedsingificantlyinmorphologicalvariationplnatlets；normaldiploidchromosomenumberwas2n 2x=26，andtertaploidchromosomenumberwas2n=4x：52．Meanwhile，aneuploidywasfoundinthepopulationofplantletsafter colchicinesoaking，leavesofploidymutationplantletswereusedasexplantstoregeneratetotubeplants，andhomozygouscloneswere obainedafterthreeregenerationandpurificationcycles．Therewasnochimerainthehomozygousclonesaccordingtoflow cytometry analysis．Conclusion I