人胚胎干细胞定向分化为血管内皮细胞的初步研究.pdfVIP

· JournalofTissueEngineeringandReconstructiveSurgery，April2010，Vo1．6No2 66 · 著 · doi：10．3969~．issn．1673—0364．2010．02．002 人胚胎干细胞定向分化为 血管内皮细胞的初步研究 王彦 钱德俭 尉真 陆峻泓 张文杰 崔磊 曹谊林 【摘要】 目的 诱导人胚胎干细胞定向分化为血管内皮细胞。方法 将来源于人囊胚 内细胞团的ES细胞，以含维 甲 酸的培养液经悬浮培养 ，先形成拟胚体 ，再将 EB贴壁 ，换含TGF—Bl的培养液继续培养 ，进行相差显微镜 、免疫荧光 、 电镜等检测。结果 人胚胎干细胞经诱导后分化成为血管样结构 ，Ⅷ 因子免疫荧光检测呈阳性 ，Dil—Ac—LDL摄取实验 呈红色荧光 ，透射 电镜显示其与正常的人毛细血管非常相似 。结论 该方法可诱导人胚胎干细胞分化为内皮细胞 ，为 骨创伤修复提供新的思路和手段。 【关键词】 骨创伤 内皮细胞 人胚胎干细胞 诱导 【中图分类号】 Q813．1+1 【文献标识码】 A 【文章编号】 1673—0364(2010)02—0066—04 PrimaryStudyofHumanEmbryonicStem CellonDifferentiationofVascularEndothelialCells WANG Ycad,O N Dejian．WE1Zhen2,LUJunhong3,ZHANGWenjieJ,CUILei3,CA0Yiliw~．JQianfoshanHospitalofShandongProvince， Jinan250014，China；2ShandongProvinceHospital，Jinan250021，China；3DepartmentofPlasticandReconstructive Surgery．ShanghaiNinthPeoplesHospital，ShanghaiJiaotongUniversitySchoolofMedicine，Shnaghai200011，China, Correspondingauthor：AC 0 Yilin． 【Abstract】 Objective Toinvestigatethefeasibilityofinducinghumanembryonicstemcell(ESC)intoendothelialcells． Methods Embwonicstem cel1一derivedhumanembryoidwasculturedinsuspensionofretinoicacid (RA) andthen emb~oidbodyrEB1formatted．EBwastransferredto0．1％ gelatincoateddishandculturedonTGF一131culturemediumby suingaadhesivemethod． Thecharacteristicsofdifferentiatedcellsweredeterminedbyimmun0histochemistry， scanning electronmicroscopyandtransmissionelectronmicroscopy．Results Differentiatedcellsweremorphologicallycharacterized asthestructureofvascularendothelialcells．TheycouldtakeupDil—LDL，bestainedpositivebyvWF．Conclusion ESC can beintroducedtodifierentiateintovascularendothelialcellsbyusing aadhesivemethodwithsuspensionofRA and TGF—B1．Thismethodissimpleandeconomic，andcanprovideseedcellsforvasculartissueengineeringortherapyofbone injury． 【Keywords】 Bonewound；Endothelium；Humanembryonicstemcells；Indu