水产动物及其产品中乙烯雌酚、甲孕酮液相芯片检验技术规范 编制说明.docVIP

出入境检验检疫行业标准草案编制说明 1.1 标准草案名称 中文 英文 1.2 与国际标准和国外先进标准一致程度情况 □等同□修改□非等效标准号 英文名称 中文名称 1.3 任务来源 批准立项的文件名称和文件号 ]36号《关于下达2012年第一批出入境检验检疫行业标准制（修）订计划项目的通知》 计划编号 1.4 制（修）订情况 制□修订 标准编号 1.5 起止时间 年 月--- 年月 1.6 单位 1.7 起草团队 1.8 专业类别 □食品（化妆品）检验；□卫生检疫；动物检疫；□植物检疫； □纺织产品检验；□轻工产品检验；□机电产品检验；□化工、矿产品和金属材料检验；□管理；□鉴定；□包装及危险化学品 1.9 102402 1.10 调整情况 2 背景情况 2.1 目的、意义 medroxyprogesterone acetate , MPA）是一种孕激素类药物，在渔药中被作为促生长剂，广泛用于安情助长和同步发情等方面以促进鱼类等生长、提高饲料转化率、节省成本、提高经济效益，其对人具有广泛的毒副作用，能引起精神抑郁、过敏等不良反应，甚至引起乳腺癌和不孕不育症。欧盟成员国早已明令严禁在食源性动物饲养管理中使用，我国农业部2002年《动物性食品中兽药最高残留限量》文件中明文规定醋酸甲羟孕酮为禁止使用，食品中不能检出。 乙烯雌酚（diethylstilbestrol , DES） 是一种人工合成的雌激素，由于其具有促进动物增重，增加蛋白质沉积和减少脂肪沉积的作用，曾被广泛作为鱼饲料添加剂使用，可提高鱼饲料转化率，促进鱼类生长。Nielsem等研究结果发现，DES具有致畸和致癌的毒性。美国食品药物管理局(The US Food and Drug Administration，FDA)早在1979年就已禁止己烯雌酚用于动物催肥。1989年，欧盟对一切含有促生长激素的动物和动物性食品实施封关禁入。我国农业部2002年《动物性食品中兽药最高残留限量》文件中明文规定该药为禁止用于所有食品的动物兽药，食品中不能检出。 目前，检测这两种残留常规的理化检测方法都采用高效液相色谱分析法（HPLC）和气相色谱/质谱联用分析法（GC/MS）或液相色谱/质谱联用分析法（LC/MS）。这些方法存在仪器昂贵、方法复杂、操作烦琐、试剂消耗量大的局限性。尤其是对于大量样品的初筛，则需要更简便快速的检测方法。目前，生物学技术在兽药残留快速筛选中得到广泛的应用，常用的有生物法和酶联免疫法。对于检测禁用药物这两种方法常常在灵敏度上达不到要求。 液相芯片技术是20世纪90年代中期发展起来的，被誉为后基因组时代的芯片技术，它有机地整和了有色微球(color-coded microspheres or beads)、激光技术、高速数字信号处理和计算机技术，集中了分子生物学、免疫学、高分子化学、激光物理学、微流体学和计算机科学等多门学科的优势，该系统进行生物样品检测通量大，灵敏度高，主要表现在： 1、检测仅需μL级的血清或者其他生物样品； 2、检测范围宽，跨度2~5个数量级，灵敏度可达pg级； 3、自动校正和校检工具可有效地保证和控制样品间差异、板间差、系统间差异； 4、短时间内可完成96个样品的检测并获得多达上万个分析数据。 5、检测项目灵活，可自由组合。液相芯片系统在芯片制作时不像片膜芯片系统每块芯片都需要点样。液相芯片系统可以根据预期用量的大小，选用一定量的某些种类小球，标记好相应的配体分子，然后混合分装即可。 我们建立的甲孕酮和乙烯雌酚液相芯片的检测标准，充分解决了甲孕酮和乙烯雌酚残留快速检测的难题，适用于水生动物及其产品，有力保障进出口及国内市场水产品安全。有一定的创新性，在食品安全领域的应用也有着一定的经济潜力。 2.2 与国内外相关标准、文献的关系 ELISA和色谱法。这二者检测过程复杂，所用仪器设备昂贵，需要训练有素的检测人员，并常常需要测定其化学衍生物，样品在检测前需要进行提纯，这些过程耗时且费用高，目前主要用于研究和确认实验，在进行大量样品筛选时难度较大。目前涉及的己烯雌酚标准包括GB/T 5009.108-2003畜禽肉中己烯雌酚的测定；GB/T 20766-2006 牛猪肝肾和肌肉组织中玉米赤霉醇、玉米赤霉酮、己烯雌酚、己烷雌酚、双烯雌酚残留量的测定液相色谱-串联质谱法；GB/T 20767-2006牛尿中玉米赤霉醇、己烯雌酚、己烷雌酚、双烯雌酚残留量的测定液相色谱-串联质谱法；农业部1031号公告-4-2008 鸡肉和鸡肝中己烯雌酚残留检测气相色谱-质谱法；GB/T 22963-2008河豚鱼、鳗鱼和烤鳗中玉米赤霉醇、玉米赤霉酮、己烯雌酚、己烷雌酚、双烯雌酚残留量的测定液相色谱-串联质谱法；G