化妆品表面活性剂眼刺激性的角膜细胞试验编制说明.docVIP

中华人民共和国出入境检验检疫局行业标准 《化妆品眼刺激性的角膜细胞试验》编制说明 任务来源及名称变化 根据国家认证认可监督管理委员会下达的国认科函[2010]88号的要求，检验检疫行业标准《化妆品表面活性剂眼刺激性的角膜细胞试验》（项目编号2010B080）由上海出入境检验检疫局负责起草。本标准为科研项目转化，在禁止动物试验国际性法规正式实施、口岸需求急迫的情况下，最初由上海局向总局化妆品工作组提出“化妆品眼刺激SIRC细胞STE筛选试验”的标准建议，后认监委下达标准名为“化妆品表面活性剂眼刺激性的角膜细胞试验”，仍由上海局获得标准主持。本课题组在参考国外文献的基础上，建立了比较标准化的方法程序，并在此系统上进行了100余份样本的检测，这些样本包含不同类型的化妆产品、以及包含化妆品表面活性剂在内的原料化学物，对方法进行了有力的验证。所以，课题组认为，口岸出入境化妆品毒理检测样本所涵盖的内容很多，单是建立表面活性剂的检测方法使得方法的应用面过窄，而且通过我们的研究，确定此方法完全适用于产品和一些成分的检测，并且本标准的特色就在于克服了其他以细胞毒性为基础试验对样本溶解性的限制，原则上适用面非常广泛。 所以在标准名称上去除“表面活性剂”，完全以“化妆品”为主题词，做到全覆盖。 目的和意义 随着世界经济的发展和人民生活水平的提高，化妆品与人类的日常生活越来越密切，化妆品的安全日益引起人们的重视。化妆品安全性评价工作是进出口化妆品检验检疫监督管理的重要内容之一，对确保进出口化妆品安全卫生质量和消费者的健康具有十分重要的作用。传统的化妆品安全评价试验基本上都是基于动物实验，但是由于国际动物福利运动的普及，欧盟在其76/768/EEC指令第七次修正案（2003/15/EC）中规定，自2009年3月11日起，禁止使用动物进行化妆品急性毒性、眼刺激和过敏试验。对我国化学品贸易影响更为深远的REACH法规自2007年1月开始实行，也提出安全性评价非动物实验优先的原则。欧盟是我国化妆品的主要进口和出口市场之一，这些指令法规将对我国口岸化妆品（或原料）检验检疫监督管理工作和化妆品贸易产生较大的影响，急迫需要采取相应的措施加以应对。 所以建立与欧盟以及国际先进的动物试验替代方法接轨的检验技术标准，减少不必要的化妆品动物试验，打破化妆品贸易中技术壁垒和动物福利壁垒，促进化妆品对外贸易的发展，具有十分积极的意义。 标准的编制过程 1、上海检验检疫局接到标准制定任务后，由起草标准负责人成立了标准起草小组。 2、标准起草小组3、本标准的征求意见稿。 4.2 成分 SIRC STE试验和Draize试验的相关性 样本配制浓度0.5%。 表2 Draize试验和STE试验分级结果（分） Draize分级 STE分级 合计 重度 中度 无/轻度 重度 9 0 1 10 中度 0 7 0 7 无/轻度 0 6 30 36 合计 9 13 31 53 与Draize的结果相比，一致率=86.8%，STE试验的灵敏度=94.1%，特异度=83.3%，假阳性率=16.7%，假阴性率=5.9%。 4.3 表面活性剂SIRC STE试验和Draize试验的相关性 样本配制浓度0.05%。 表3 Draize试验和STE试验分级结果（分） Draize分级 STE分级 合计 重度 中度 无/轻度 重度 2 0 0 2 中度 3 12 1 16 无/轻度 0 2 8 10 合计 5 14 9 28 与Draize的结果相比，一致率=78.6%，STE试验的灵敏度=97.4%，特异度=80.0%，假阳性率=20.0%，假阴性率=2.6%。 4.4 讨论 以标准动物眼刺激试验的结果为标准，在兔眼角膜SIRC细胞系上，进行短时间暴露试验。受试物分别包括（化妆）产品、成分（化学品）、化妆品常用表面活性剂。结果表明，SIRC-STE试验可以较好预测受试物眼刺激状况，其灵敏度普遍较高，可以作为眼刺激替代试验的筛选试验或者组合使用。由于表面活性剂的特殊理化性质，通过我们的研究（数据未在此列出），选用的受试浓度为0.05%，这与其他两类受试物是有区别的。 标准的主要内容 本标准由6个部分组成。 范围：规定了本标准的适用范围 规范性引用文件：采用了首次颁布的SN体外替代试验室规范和细胞培养规范。 定义和缩略语：规定了本标准中使用到的一些概念的定义和缩略语。 原理：本标准的基本原理。 仪器与试剂耗材：给出了完成本标准所需的设备，基本试剂耗材，以及试剂的推荐。 试验方法：给出了SIRC细胞来源要求、培养基、冻存复苏的方法以及使用原则；给出了细胞准备、样品溶剂准备、样品及参照物准备以及SIRC STE试验具体的实施步骤。 说明 1