进出口食品中磷酸胆碱含量的测定.docVIP

SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T XXXXX—XXXX 进出口饮料中磷酸胆碱的测定 液相色谱-串联质谱法 Determination of Choline phosphate in drinks for import and export — LC-MS/MS method （送审稿） XXXX - XX - XX发布 XXXX - XX - 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布 ICS 备案号： 前 言 本标准依据GB/T 1.1-2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则》、GB/T 20001.4-2001《标准编写规则 第4部分：化学分析方法》起草本标准本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法酒类饮料需要HLB小柱净化除外，试剂均为分析纯，水为一级水。 色谱纯色谱纯色谱纯μg/mL，1 ℃～0.22 μm水性滤膜。 5 仪器和设备 5.2 分析天平：感量为0.01 g和0. mg。 旋涡混合器。 固相萃取装置。 氮吹浓缩仪。 超声波清洗器。 ℃以下冷藏保存。 7 测定步骤 7.1 提取 7.1.1 果汁、运动饮料、葡萄酒和啤酒 准确称取1 g样品（精确至0.001g），加水稀释至10.0 mL，混匀，准备过固相萃取柱净化。 7.1.2 清酒 准确称取1 g样品（精确至0.001g），加水稀释至100.0 mL，吸取1.00 mL样液，加入1.00 mL 乙酸铵溶液（4.5），混匀，准备过固相萃取柱净化。 7.2 净化 7.2.1 果汁、运动饮料和清酒 准确吸取提取液1.00 mL过SAX固相萃取柱，弃去流出液， 用3.0 mL甲醇淋洗。然后用8.0 mL 10 %的甲酸甲醇溶液（4.6）洗脱，洗脱液用氮气吹干，加1.00 mL乙腈/水（1:1, V/V）定容。混匀后过0.22 μm微孔滤膜，供液相色谱-串联质谱测定。 7.2.2 葡萄酒和啤酒 准确吸取提取液1.00 mL 过HLB 固相萃取柱，用2.0 mL水洗脱， 接收全部流出液。将流出液全部转移至 SAX固相萃取柱，弃去流出液，用3.0 mL甲醇淋洗，然后用8.0 mL 10 %的甲酸甲醇溶液（4.6）洗脱，洗脱液用氮气吹干，加1.00 mL乙腈/水溶液（1:1, V/V）定容。混匀后过0.22 μm微孔滤膜，供液相色谱-串联质谱测定。 7.3 测定 7.3.1 液相色谱参考条件 a) 色谱柱： HILIC，1.7 μm，50 mm×2.1 mm或相当者； 流动相：乙腈-0.1甲酸水溶液（50:50） 流速：0.2 mL/min 柱温：35 ℃； 进样量：5 μL。 离子化模式：电喷雾电离（ESI）按照上述仪器条件测定样液和标准工作溶液，在相同实验条件下，样品中待测物质的保留时间与标准溶液的保留时间偏差在±2.5 %之内；且样品定性离子的相对丰度与浓度近的标准工作溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表规定的范围，则可判定为样品中存在待测物。 表 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 (%) (50 (20至50 (10至20 (10 允许的相对偏差 (%) ( 20 ( 25 ( 30 ( 50 在仪器最佳工作条件下，对标准工作溶液()进样。外标法定量样液中磷酰胆碱的响应值应在仪器测定的线性范围内，若超出线性范围可用流动相适当稀释。标准溶液多反应监测（MRM）色谱图参见附录。 除不加试样外，均按上述步骤进行。 按照式()计算 ……………………………… (1) 式中： X ——试样中待测物的浓度，单位为克每千克 (g/kg)； c ——试样终溶液中待测物的浓度，单位为克每毫升 (μg/mL)； co ——空白试验溶液中待测物的浓度，单位为克每毫升 (μg/mL)； V——试样溶液定容体积，单位为毫升（mL）； m——试样溶液代表的试样量，单位为克（g）F——换算系数，果汁和运动饮料、葡萄酒和啤酒中F=10，清酒中F=200。 9 测定低限、回收率 9.1 测定低限 本方法的测定低限的测定低限不同样品基质中的回收率试验数据见表。 添加浓度 g/kg) 回收率范围%) 果汁 啤酒 葡萄酒 运动饮料 清酒( 0.10 81.7～～～～～ 0.20 93.5～～～～～ 1.0 92.4～～～～～ (注：清酒的添加浓度分别为：1.0 mg/kg ，4.0 mg/kg，10.0 mg/kg 附 录 A （资料性附录） 质谱参考条件1) 电压：1.0 k