不同浓度共聚物在保护超声介导细胞损伤和基因转染中的作用.pdfVIP

维普资讯 亿 亏与生 物 Z狸 2007，Vo1．24No．8 田 Chemistry Bioengineering 不 同浓度共聚物在保护超声介导细胞损伤 和基因转染中的作用 陈云超 。张青萍 。黄道 中。李开艳。王志辉 。洪 恺 。王 芬 (华中科技大学同济 医学院附属 同济医院，湖北 武汉 430030) 摘 要 ：选用三种不 同的细胞系C2C12、3T3一MDEI和 CHO-E为研究对 象，考察 了三种不 同水溶性的共 聚物 F127、 L61和 P85在超声介导细胞损伤和基因转染 中的作用 。结果显示 ，在较低浓度时，共聚物提高了超声介导的细胞损伤(P O．05)和基 因转染 (PO．01)；在较高浓度时，F127和 P85可 以保护超声介导的细胞损伤作用(PO．01)，而 L61有较 高的毒性 。 关键词 ：共聚物 ；超声；细胞保护；细胞损伤 ；基 因转染 中图分类号 ：R392．28 R394 文献标识码 ：A 文章编号 ：1672—5425(2007)08—0033—05 共 聚物分子 由亲水基 团簇 EO和疏水基团簇 P0 共聚物 F127、P85和 L61的分子通式 为 EO一 以E()PO一EO 三联形式存在 ，．z、Y数量 的变化可 POy-E()r(其 中F127：lz一100，Y一65；L61：．27—2，Y一 决定整个分子的大小 、结构和亲水性 。在微粒形成临 30；P85：：26，Y一40)，购 自Sigma公司。将三种共 界浓度 (CMC)以下时 ，共聚物分子以单体 的形式存在 聚物溶解在生理盐水中配成溶液 ，经微滤器过滤除菌 于水中，这时为单聚体 。当浓度在 CMC以上时 ，单聚 后备用。 体分子将相互聚合为微粒体。这种共 聚物微粒体常被 C2C12、3T3-MDEI和 CHO-E细胞培养在含 5 描述为以PO段相互作用形成核心 、E0段在四周突出 CO：、37℃的温箱 中。其中C2C12的培养液为DMEM 的花冠样球形结构_1～]。由于这种 两性特点 ，共 聚物 中含 20 (体积分数 ，余 同)Fetalcalfserum (FCS)、 在制药业中常被广泛用作增溶剂、乳化剂 、稳定剂和佐 1％ L—Glutamine(LO)、1 Penicillin-streptomycin 剂 ，近来更被应用在基因转染中 j。 (PS)和 1 Chicken embryo extract(CEE)；3T3一 超声 (Uhrasound，US)在临床主要用于诊断 ，近 MDEI的培养液含 10 FCS、1 LO和 1 PS；CHO— 来也被用作真核细胞 的非病毒基因转染手段 ，一般认 E的培养液含 10 HeatinactivatedFCS(Hi—FCS)、 为声致孑L隙效应引起质膜通透性的短暂增加是其主要