供体肺保存方法及移植后供体肺损伤机制的初步研究.pdf

中国医学科学院 中国协和医科大学博士论文 中 文 摘 要 一)离体肺移植实验动物模型的建立和应用 【目的l:改进目前离体肺灌注模型，建立简单、可靠的肺移植实验动物模 型，并应用于研究供体肺的保存。[方法1:取12只新西兰大白兔，每次实验随机 取2只分别作为供体兔和受体兔;供体肺经肺动脉灌注低钾右旋糖配液 (LPD液) 后保存16小时(40C);左侧供体肺通气 (潮气量25ml、呼吸频率4。次/分钟、氧 浓度 100%)，通过微量泵注入由受体兔右心房插管引出的静脉血，供体肺氧合 后的动脉血注入受体兔颈动脉，模拟肺移植的循环灌注过程1小时:循环灌注过 程中每隔10min测定流入、流出供体肺血液的血气指标 (PV02,PVC仍、Pa02, PaC02,PHv,Hbv)，每隔l0min记录供体肺的肺动脉压(PaP)、气道峰压(PawP)a 结〔果I:受体兔在整个循环灌注过程中可提供接近生理状态的静脉血 (Pv02=36.55-38.32mmHg,PHv=7.35^7.38):循环灌注供体肺1小时，在前30 分钟供体肺可保持良好氧合功能(Pa02=130.53-198.90mmHg)及顺应性((PaP= 20.38-26.72mmHg,PawP=5.78^-8.45mmHg)，随着灌注时间的延长，供体肺出 现明显的再灌注损伤;肺功能(Pa02二8mmHg,PaC02一50.96mmHg) 及肺顺应性(PaP=41.95-80.07mmHg,PawP=12.95-18.64mmHg)明显降低 (P0.001).结【论I:该离体肺移植实验动物模型能简单、可靠的模拟肺移植的 循环过程，可用于肺移植及供体肺保存的研究。 二)经左房逆行灌注对兔供体肺保护作用的实验研究 I目的I:目前对供体肺保护的研究大多局限于改变保护液成份、保存温度、 充气成份及状态等方面，对于保护液灌注方法的研究较少。传统的经肺动脉灌注 保存液忽略了支气管动脉循环的重要性。本部分研究分别通过左房及肺动脉灌注 供体肺，比较两种灌注方法对供体肺功能及结构的保护作用。方「法I:取24只 新西兰大白兔，随机分为正灌组 (AF组 供体肺经肺动脉灌注LPD液 )与逆 灌组 (RF组 供体肺经左房逆行灌注LPD液 )，保存 16小时((40C);循环灌注 中国医学科学院 中国协和医科大学博士论文 过程1小时;循环灌注期间每隔10分钟测定Pa02,PaCO2;计算A-aD02;每隔 IOmin记录供体肺动脉压 (PaP) 、气道峰压 (PawP);计算比较两组供体肺顺 应性 (CL)及含水量的变化;光学显微镜、透射电镜分别观察两组供体肺移植前 后的病理改变。[结果]:RF组供体肺在整个循环灌注过程中能基本保持良好的 肺功能，至60min仍能保持Pa0284.96mmHg;AF组供体肺在移植后前20min 与RF组相比，Pa02无差别，而再灌注20min后各时段，AF组氧合能力明显 下降，与RF组相比有显著性差异 (54.42-118.87mmHgvs84.96^-140.68mmHg P0.01);至再灌注50min后，AF组PaC02高于RF组(40.31-V50.96mmHgvs 35.09-38.12mmHgP0.05):A-aD02结果与Pa02的结果相似。在移植20min 后各时段，AF组PaP均高于RF组 (23.77^80.70nunHgvs20.10-48.85mmHg P0.05-0.001);移植30min后各时段，AF组Pawp明显高于RF组(8.4518.65 mmHgvs6.27--12.82mmHgP0.01):至再灌注末期RF组与AF组相比仍能保持 较好的顺应性(0.1585vsO.1196cm3.cmH20-P0.001);移植后AF组供体肺含水 量 (88.9%)高于RF组(82.4%)(P0.01)。光镜下观察:供体肺移植后，AF组 组织间质及肺泡腔出血水肿明显，肺泡壁增厚、结构破坏;而RF组仅轻度充血， 间质水肿较轻，肺泡结构基本完整。透射电镜观察:供体肺移植后，AF组肺泡 细胞结构破坏明显，线粒体肿胀、峭脱失，板层小体内容减少:RF组能基本保 持I、11型肺泡细胞的完整性，线粒体损伤较轻，气一血屏障完整。[结论1:经 左房逆行灌注LPD液，对供体肺的保护效果优于经肺动脉灌注;能在一定