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中国柑桔学会2010年年会摘要集
基于RNAi／PTGS原理的抗柑橘衰退病研究
阳佳位12闰虎斌1料程春振-，。朱世平13钟广炎妒”陆志明3
(1中国农业科学院柑橘研究所，重庆400712；2开县果品技术推广站，重庆405400；
3西南大学园林园艺学院，重庆400716)
摘要：通过对CTV(CitrusTrsitizaVirus)全基因组中的i个RNA沉默抑制因子保守序列设计引物，获得
复序列的RNAi载体。以意大利酸橙和锦橙的上胚轴为外植体，采用农杆菌介导法对构建好的4个RNAi载体
进行了遗传转化。通过共培养和筛选培养，共获得r20个抗性不定芽。将这些抗性不定芽进行了嫁接，其中嫁
接成活了15株。以转基岗植株的基因组DNA为模板进行PCR检测，结果显示其中有14株为转基冈植株。对
转基因植株经过两次CTV攻毒试验后进行检测发现，目前已经证实有l株转基闪酸橙植株表现出对CTV强
度株系TRLSl4具有抗性。此研究不仅有町能获得抗CTV的砧木新品种，而且为柑橘的抗病育种提供了一些
参考。
关键词：柑橘CTV病毒；RNAi；RNA沉默抑制子；抗病毒育种
Anti-CitrusTristezaVirus BasedonRNAi／PTGS
study principle
Chun-zhenl3’ZHU
YANGJia—weiP·YANHu-binl”·CHENG Shi-ping‰ZHONGGuang-yanl3”。LUZhi-min93
institute
J．Citrusresearch 400712，China
ofChineseacademyofagricultural$ciell,ce$，Chongqing
extension 405400，China
2．Kaixianfruittechnology station．Chongqing
and Architecture，Southwest 400716，China
3．Col@ofHorticultureLandscape Universie，Chongqing
conservednucleotide oft}Iree factor and
Abstract：The sequencessilencingsuppressorgenesp25．p20p23
wereclonedfrom Ttristeza onthe and weresue--
C，ITV(CitrusVirus)genome，seperately．Basedsequences，p25
p23
constructedinto vex：，tors．Meanwhile．two and ac—
RNAi sequences
cessfuly multi—gene p2520p252023wereobtained
as
tothemethodof constructedRNAi
SOE(GenebyOverlapExtension)，andsubsequently expression
cording Sphcing
fourRNAivectorsweieintroducedi
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