丙戊酸抑制肝癌细胞生长的研究.pdfVIP

· l86 · 2009年 月第28卷第 3期 GansuMedicalJournal，Jun2009。Vo1．28。No．3 丙戊酸抑制肝癌细胞生长的研究 田迎霞 杨燕 王德贵 李波 孙玉凤 摘【要】 目的：探讨丙戊酸(valproicacid，VPA)对人肝癌细胞株HepG2细胞生长的影响。方法：将 VPA以不同浓度(0．5。1， 1．5，3mmol／L)不同作用时间作用于HepG2细胞，检测PVA对细胞增殖的抑制作用 ；Hochest33258染色观察细胞形态学改变。结 果：VPA对细胞生长有抑制作用 ；VPA处理后细胞Hochest染色可见细胞凋亡；VPA与化疗药物有协同效应。结论：VPA能有效 抑制肝癌细胞生长，促进肝癌细胞凋亡并与化疗药物有协同抗癌作用。 【关键词】 丙戊酸；肝癌；治疗；协同 中图分类号：R735．7 文献标识码：A 文章编号：1004—2725(2009)03—0186—02 肝细胞癌为常见肿瘤，死亡率高，生存期短，多数患者就诊 lO01xl，轻轻振荡，用酶标仪测定每孔吸光度 OD值 ，测定波长 时已进入晚期，不宜手术切除。探讨有效的药物治疗手段十分 492nm，参考波长630nm，计算不 同浓度VPA对肝癌细胞的生 必要。组蛋白去乙酰化酶抑制剂 (histonedeacetylasesinhibitors， 长存活率，存活率(％)=处理组OD值均值／对照组OD值均 HDACIs)自20世纪9O年代被发现具有抗肿瘤作用以来，成为 值 X100％。1mmol／LVPA和／或2mg／L阿霉素(ADM)、5mg／L 备受关注的热点。组蛋白的乙酰化过程和真核细胞基因转录调 顺铂 (DDP)、5mg／L丝裂霉素 (MMC)处理 24，48，72小时后 控密切相关，它们受一对功能相互拮抗的蛋 白酶即组蛋白乙酰 MFF显色 ，药物联合效果评价采用公式CDI=AB／(A XB)。 化转移酶(HAT)和组蛋白去乙酰化酶 (HDAC)调控。正常细 (AB、A和B分别代表联合组、A药组和B药组吸光度值与阴性 胞中，这一对酶处于动态平衡状态，HAT的作用使组蛋白末段 对照组吸光度值的比值)CDI小于、等于或大于 1分别代表药物 乙酰化，舒展核小体结构、激活基因转录，而 HDAC的功能相 有协同，相加和拮抗作用。 反，抑制基因转录，目前已证实HDAC功能异常与肿瘤的发生和 2 结果 发展有直接关系。HDAC抑制剂 (HDACI)可 以通过抑制 HDAC，阻断由于HDAC功能紊乱而导致的基因表达受抑，起到 2．1 VPA 对 HEPG2细胞生长的影响 VPA浓度为 1—3 治疗肿瘤的目的… 。其主要生物效应包括诱导肿瘤细胞分化、 mmol／L时，对HEPG2细胞体外生长均有明显的抑制作用(P 停滞细胞周期于G1和G2期，激活细胞凋亡基因，增强肿瘤细 0．05)。呈现明显的剂量依赖关系。在同一药物浓度下，细胞抑 胞对化疗和放疗敏感性，逆转肿瘤的恶性表型等抗肿瘤效应。 制率随作用时间的延长有增加趋势(见图1)。 随着研究深入，目前 HDAC成为抗肿瘤药物研究的重要靶酶。 丙戊酸(valproicacid，VPA)具有组蛋白去乙酰化酶抑制作用，其 生物利用度高，副作用小。并且作为抗癫痫药物I临床使用已经 50余年，相对 比较安全。本研究通过观察 VPA对肝癌细胞 0．8 HepG2的影响，初步探讨VPA治疗肝癌的可能途径。 = 虿00· = 1 材料与方法 吾旺4 1．1 材料 VPA纯品为Sigma产品；人肝癌细胞株HEPG2由 n2 一一 n5 。．_lmM ； 一 I_5州 ·● 3mM 兰州大学医学实验中心提供；32(4，52二甲基噻唑222r1)22，52 ； 0 L… …，一—u一 一一一 —