全血尿酸生物传感器的研制及临床应用.pdfVIP

第’+ 卷 分析化学 （T:UJ INVUN ） 仪器装置与实验技术 第$ 期 #%%3 年$ 月 HAGE1E W;DXG=? ;Y VG=?Z[@=? HAE-1[XZ 9!+ , 9! 全血尿酸生物传感器的研制及临床应用 ! # ! ! # 陈真诚 王红艳 何继善 邓振生 ! （中南大学信息物理工程学院生物医学工程研究所，长沙$ !%%’ ） # （中南大学校医院检验科，长沙$ !%%’ ） 摘 要 研制了一种利用全血来测试尿酸含量的安培型生物传感器。采用铁氰化钾作为媒介体，将尿酸氧化 酶固定在羧甲基纤维素钠处理过的碳电极表面，研制成一种尿酸生物传感器。该传感器在恒电位% ( ’ ) 和尿 酸氧化酶的催化作用下，使被检测物尿酸氧化，铁氰化钾还原，在电极表面产生氧化*还原峰，利用安培法可对 尿酸进行间接测定。该传感器经临床测试，尿酸的测定范围可达#+ , #%% -./ 0 ，!% 1 内即可达到稳态电流， 测试结果的线性范围较好，相关系数为% ( 223 。另外，尿酸传感器具有好的抗干扰性，测试精度高、重复性 好， 456 7 #8 。 生物传感器，尿酸氧化酶， 关键词 安培法 ! 引 言 酸浓度过高或过低，都会引发急慢性肾炎、肾结核、痛风、慢性白血病、真性红细胞增多症及多发性 骨髓瘤等尿酸综合症。 目前已报道的测定尿酸的方法有重量法、滴定法、还原法和酶法等［! , ’ ］。重量法和滴定法操作繁 琐，而且准确度低，不适于尿酸的精确测定；临床上通常采用还原法和酶比色法。用还原法检测，尿酸在 碱性条件下被磷钨酸氧化成尿素，磷钨酸被还原成钨蓝，后者生成量与尿酸含量成正比。其缺点是：血 样中的抗坏血酸易干扰。样品必须事先进行脱蛋白处理，需要昂贵设备和专业分析人员。酶法分为酶 联光度法和酶联电化学法，前者常用于医院的自动生化分析仪，适于大批量试样的分析作业，但是血液 分析前经离心分离为血清或血浆，要求专业人员和专门的试剂，不适于家庭中使用。酶联电化学法［$ , 9 ］ ［3 , 2 ］ 特别有利于仪器的小型化和适于非专业人员操作。应用尿酸酶电极 测定人体血和尿中尿酸的浓 度，是一种准确、快速、简便的方法，对人体血液中尿酸的定量分析无论是在药物控制方面，还是在临床 诊断方面，都具有重要意义。 本研究旨在开发一种基于家庭保健和各级医院应用的一种方便、快速测量血液尿酸含量的生物传 感器，减少病人去医院的不便和降低病人医疗开支。本传感器在测试时只需要约# !0 的血液，且在 !% 1 内即可检测出血液中尿酸的含量。 # 实验部分 # ( ! 仪器与试剂 HIJ99% 电化学工作站（美国HIJ 公司）；$% ! 型恒电位测试系统（江苏江分电化学仪器有限公司） 及分析天平、磁力搅拌器、水浴箱、玻璃试管等。尿酸氧化酶（KL6M ，!+N/ -. ，5.-= 公司）；碳酸锂、铁氰 化钾、硼砂、磷酸氢二钾、尿酸粉末、羧甲基纤维素钠均为分析纯。实验用水为去离子水。 #$ !$ ! 尿酸标准液的制备 称取% -. 0 HL ，溶入!+ -0 水中，室温下溶解至饱和，然后用定性滤纸 # ’ 过滤，去渣，于滤液中加入!%% -. 尿酸，+% , 9% O 水浴至尿酸完全溶解，冷却后用水稀释至!%% -0 ，得 到!%%% -./ 0 的