高产葡萄糖耐量因子(GTF)酵母菌发酵条件的研究.pdfVIP

高产葡萄糖耐量因子(GTF)酵母菌发酵条件的研究 高艳红，吕加平※，刘 鹭 (中国农业科学院农产品加工研究所／农业部农产品加工与质量控制重点开放实验室，北京100193) 摘要：本试验对YSI·3．7生产GTF的摇瓶发酵环境，包括发酵过程中葡萄糖的变化、加铬方式、发酵液补铬、补料时 间和补料浓度等方面进行了研究，初步确定了以YSI．3．7高效生产GTF的发酵工艺条件。 关键词：葡萄糖耐量因子，酵母菌，发酵条件 0引 言 Tolerance GTF即葡萄糖耐量因子(Glucose Factor)，是一种能维持动物血液中葡萄糖水平正常的物质，它能增加 动物的葡萄糖耐受量和提高胰岛素的活性功能，促进胰岛素与细胞膜受体结合，进而刺激动物机体组织对葡萄糖的吸 收，是一种预防和治疗糖尿病的功能因子flo】。富铬酵母是GTF的重要来源，通过筛选可以得到铬耐受性强和铬富集 力高的酵母菌株，对其发酵条件进行优化分析，可以得到产量高活性高的GTF，进而提高富铬酵母发酵生产GTF的 效率。本试验在摇瓶发酵条件下对YSI．3．7生产GTF的发酵工艺，包括发酵过程中葡萄糖的变化、加铬方式、发酵液 补铬、补料时间和补料浓度等方面进行了研究，初步确定了以YSI．3．7高效生产GTF的工艺条件，为大规模高效生产 GTF奠定了基础。 1材料与方法 1．1试验材料与仪器 cerevisiae)，为YSI．3．7，中国农业科学院农产品加工所提供。 出发菌种为啤酒酵母(Saccharomyces WE微滤除菌的三氯化铬溶液e 爱粉1魄，大豆蛋白胨209，调整pH为5．6，蒸馏水1000ml，灭菌后加入2．05 微波消解所用浓硝酸和高氯酸为优级纯，1．000g／L铬标准贮备液(一级标准物质)购自中国计量科学院。试验所 用其他试剂均为常用生化试剂和分析纯。 温压双控密闭微波消解／萃取仪，购自上海新仪微波化学科技有限公司；火焰原子吸收分光光度计，日本岛津公司 产品。试验所用其他仪器均为微生物实验室常用仪器。 1．2加铬方式对发酵效果的影响 发酵时间30h，培养温度28C，摇床转速为200r／min。并与种子液中不加铬的情况进行对比。 1．3发酵液补加铬量对发酵效果的影响 作空白对照。 1．4发酵液中葡萄糖的测定 rim离心10min，取 如1．2接种种子液进行发酵，每隔2小时取样一次，总发酵时间为72h。将各个样品在5000 上清液分别吸取lml，按照葡萄糖标准曲线测定的方法测定发酵液中的葡萄糖含量。本试验采用硫酸-苯酚法测定葡萄 糖含量【4l。 1．5补料时间对发酵效果的影响 如1．2进行发酵试验，选择发酵液葡萄糖水平变化较显著的几个发酵时间点补加发酵培养基5倍浓缩液，同时补充 部分铬离子，以缓解由于补加料液引起的铬离子浓度降低的问题。 基金项目：国家航天育种工程项目(2006HP20013)子课题 作者简介：高艳红(1983．)，硕士研究生，主要研究领域：食品微生物学。 sina．corn lvjp586@vip 蔓婴堕全里窒主曼塑三型堡堕堑壁堕叁矍皇垦查主曼塑三垫查型堑堕墨堡塑堡塑叁笙皇蔓—————一 1．6黧篇黧戮程中葡萄糖变化曲线上选取一个适宜的时眦向发酵培养基中补力Ⅱ发酵培养基 45、 6 酌，则2进行发酵撩篙需淼篆篇裂纂}茹淼刃哑2、 3、 、 倍发酵浓缩液，同时补充部分铬离子，以缓解由于补嬲科撒引起圈诒i筠亍凇厦阵‘氐H“叫飚。 的1、 g／L的三氯化铬溶液。接种量为10％， mL的YEPD液体培养基中加入2