莲藕腐败病病原菌致病性及遗传差异性的研究.pdfVIP

表珈盖暮(学术版) 一103- JOURNALOFCHANGJIANGVEGElABLES DOI：10．3865／j．issn．1001-3547．2010．14．036 莲藕腐败病病原菌致病性及遗传差异性的研究 梁志怀1，魏林1，安哲宇2 (1．湖南省植物保护研究所，湖南长沙，410125；2．中南大学研究生院隆平分院) 摘要：对采自湖南省不同地区的莲藕腐败病病原茵进行了藕块茵丝块和茵丝体接种、藕叶茵丝块和孢子悬浮液喷 雾等人工接种。以测定其致病性。试验结果表明，用病原茵茵丝块对嫩藕藕块进行接种发病率最高，发病最重，可作 为室内莲藕抗腐败病品种筛选、病原茵致病性室内测定的首选接种方法。试验结果还表明，来源于非莲藕寄主的镰 刀茵对莲藕具有一定的侵染性。使莲藕呈现典型的腐败病症状。此外，应用RAPD分子标记技术对供试镰刀茵菌株 进行遗传多样性分析。UPGMA聚类分析显示：供试菌株间存在着一定的遗传差异性。 关键词：莲藕；腐败病菌；人工接种；致病·if-__；遗传多样性 莲藕是近几年农业结构优化调整、生态农业发展 黄瓜枯萎病株。 的主要水生蔬菜之一，大田种植、池藕开发已成为农 1．2供试藕块 民增收的主要经济来源。莲藕腐败病为莲藕牛产上的 从藕田里取长势较为一致的健康嫩藕节，取中间 主要病害。给莲藕生产造成较大的损失，严重的可使 段6em，从中间纵切后供试。 莲藕商品价值减少60％以上【11。由于藕农常习惯于周 1．3不同接种方法测定供试病原菌致病性【2·31 年和连年的重茬种植，该病的发生有逐年加重的趋 ①病原菌菌丝牙签接种接种物培养：将供试镰 势。莲藕腐败病的初侵染源是带菌的种藕和带病的土 刀菌移植于PDA培养基平板上。于25℃下恒温培养 壤，最初发病受害部位为地下茎，不易观察，常失去最 4—5d，备用；选用软木质牙签，水煮2—3次(防止牙签 佳防治时期。化学防治收效不大。因此，利用抗病品种 上的化学酚类物质等抑制镰刀菌的生长)。每次煮1 是防治莲藕腐败病最为有效的措施，这就有必要确定 h．煮后用清水冲洗2。3次，晾至半干后将牙签尖部轻 腐败病菌的致病力与优势种群。本文研究确定了测定 放于装有PDA培养基的培养皿中．牙签的尾部用灭 莲藕腐败病菌致病性的快速、准确、简便鉴定的方法， 菌的直径O．5cm的滤纸托起，每皿放3根，将7个供 crux0．5 并对供试菌株间的致病性分化与遗传背景间差异性 试镰刀菌菌块(0．5 cm)分别接种于培养皿的 的关系作了初步分析，结果如下。 中央。置于25℃下培养，使病原菌从培养基向牙签上 蔓延生长．当牙签从尖部被病原菌覆盖至牙签的1／4 l材料与方法 后，用于供试藕块的接种。 1．1供试病原菌 病原物接种：先用灭菌的大号注射针头在藕块要 选取莲藕腐败病主要致病菌镰刀茵作为供试菌 接种的部位刺lem深(防止直接用牙签插入时附着 株．7个镰刀菌菌株中有5个菌株为不同区域发病藕 在牙签上的病原菌脱落)．再将带菌牙签插入藕块接 上分离、纯化培养获得。另2个菌株为从百合、黄瓜枯 孔中。每孔接牙签2根．每藕块接3个孔。接种后的藕 萎病病株上分离、纯化培养获得。7个供试菌株来源分 块置于(26+1)℃温度条件下的培养箱中保湿培养。 别为F。：长沙县藕田病株；F2：湘乡藕田病株；F3：超市 ②病原菌菌丝块接种藕块接种：将在PDA培养 病藕；F。、F5：长沙市菜市场病藕