糖基化终末产物对视网膜色素上皮细胞表达NF—κB及VEGF的影响.pdfVIP

2010年3月 第 14卷 第 3 · ·- — — 325 。-_—— 文章编号：1007．4287(2010)03—0325一o4 糖基化终末产物对视网膜色素上皮细胞 表达 NF—feB及 VEGF的影响 李 佳 ，吴雅臻 ，刘 辉 ，魏海峰 (1．吉林大学第二医院 眼科，吉林 长春 130041；2．吉林大学药学院实验病理与毒理教研室，吉林 长春 130021) 摘要：目的 研究糖基化终末产物 (AGEs)对人视网膜色素上皮(RPE)细胞表达核因子kappaB(NF-tcB)及血管内皮 生长因子(vEGF)的影响。方法 体外培养人 RPE细胞，分别加入浓度为50mg／L、100mg／L、200mg／L的AGEs，采用免 疫细胞化学法检测 ⅦGF蛋 白的表达 ，免疫荧光染色观察NF-xB活化情况 ，应用WestemBlot方法检测 VEGF的蛋白水 平。结果 免疫细胞化学染色结果表明，对照组仅少量细胞有 VEGF弱阳性表达，AGEs各浓度可见细胞浆黄色或棕 黄色着染，随作用浓度的增加其表达逐渐增强。免疫荧光染色显示 AGEs各浓度组可见 NF．xBp65向细胞核内转移 ， 但未见明显的浓度依赖性。WesternBlot检测显示VEGF蛋白在 50mg／L、100mg／L、200mg／LAGEs组比空白组及对照 组VEGF含量明显升高 (P0．05)，200mg·L 组较其它组 VEGF含量明显升高 (P0．01)。结论 AGEs能促使人 RPE细胞VEGF表达上调，并可促进RPE细胞NF-tcB的活化。 关键词：糖基化终末产物；核因子 kappaB；年龄相关性黄斑变性 中图分类号：R774．1 文献标识码：A EffectsofadvancedglycationendproductsontheexpressionofVEGFandNF-r,B inculturedhumanRPE cells ，』肋 ， WUYa—zhen，删 Hui，eta1．(1．脚 0 ofophthalmology，SecondClinicalHospital，JilinUniversity，Changchun130041，Chi— M ；2．LaboratoryofPathobiologyandToxcioloyg，CoZlegeofPharmacy，JilinUniversity，Changchun130021，China) Abstract：Objective TheaimofthisstudywastoinvestigatetheeffectsofAGEsontheexpressionofnuclearfactorkappaB (NF-tcB)andvasoulraendothelialgrowthfactor(VEGF)inhumna retinalpigmentepithelial(RPE)cells．Methods HumanRPE cellslineswasmaintainedinDMEM medimu containing10％ fetalbovine9chin．Theexperimentgroupsraewiht thedifferentconcen— trationofAGEsas50mg／L，100mg／L，200mg／L，andthepropetional concentrationofBSAsasthecontrolgroups．Theexpressionof theVEGFproteinisbyimmunocytochemicalmethodandwesternblot．Th eactivationoftheN KBisdetectedbyimmunofluorescenee method．Results Th eimmunocytochemicalmethodandwesternblotshowedthattheexpressionoftheVEGFproteintoincreasegrad— ually．(P0．05)．The methodshowedt