生长因子对卵母细胞体外成熟及早期胚胎体外发育影响.pdfVIP

tt一{l_ 维普资讯 第 l3卷 第 l期 广 西 农 业 大 学 学 报 1994年 3月 Vo1．13 No．1 J0URNAL OF GUANGX1AGRIcUITURAL UN1VERS1TY M arch 1994 生长因子对箩母细胞体外成熟及 早期胚胎体外发育的影响 李兵兵 卢克焕 (广西农 蓊醵 殖菥戛互■i手530005) 摘要 为了探讨生长因子 (EGF，PDGF)对牛卵母细孢体外成熟与早期胚胎体外发育的影 响，本研究进行 了两个实验 。实验 1t在卵母细胞体外成熟 (IVM)中，将卵母细胞平均随机的 放入表皮生长固子浓度为 0，2．5，25，50 ／L的成熟培养蒗和对照纽中。实验 2：在早期胚胎 体 外培养 (IVC)过程 中，将受精卵平均随机分配入 5个不同培养穰的处理组 t(1)TcM-199+ 10 阉公牛血精 4SS)}(2)TCM一199+EGF+PDGFf(3)TCM一199+EGF}(4)TcM一1g9+ PDGF~45)TCM一199+无生长固子 其 中EGF：50 g／L，PDGF：0．1~,g／L。2，3，4，5组有 0．】 PVA和 0．3 BSA，并与颗粒细孢单层协同培养 卵母细胞的体外成熟 41VM)、体外受 t 精 (IVF)和早期胚胎体外培养 (IVC)的方法与Lu等 41987)报道的相同。结果表明：浓度为 50a,g／L的处理组分裂率与对照组无差异 (89．0 ，92．4 ．PO．05)，而浓度为0，2．5．25 窖／ L的处理组分裂率均显著溉于对照组 (78．6 ，82．0 ，84．3 ，PO．05)，在囊胚率和第 7d 一 缎胚胎率上各组均无差异 。EGF在体外培养 中单独使用与其它处理相比发育速度快 ．囊胚率提 高 ．与只使用 PDGF相 比差异显著 (P0．05)．但囊旺率仍没有达到对照组的水平 (分别为 36．3 ，4g．5 ，Po．05)．在本实验条件下PDGF没有促进作用 ，EGF和PDGF问无相互影 响 。 、 关键词 体外成熟f体外受精 ；体外培养； — ·r ’ — 一 早期胚胎I表皮 兰旦孟I血小扳 生长 固子 中圉分类号 $823．3；Q954．44；$954．45 人们在体外培养哺乳动物细胞时发现血清对细胞的增殖不可缺少。血清是 由多种有机 、 无机物质组成的复杂的体液 ，它除了含有蛋 白质、维生索、脂肪、激素、氨基酸等外，还 有各种多肽类生长因子 ]，这是一类对细胞的生长具有强烈促进作用的物质。近年来 ，越来 越多的人使用生长因子来研究它对卵母细胞体外成熟和体外发育的影响。表皮生长因子 (EGF)和血小板生长因子 (PDGF)是其中的两种 。据报道 ，表皮生长因子对牛卵母细胞 的体外成熟和早期胚胎的体外培养均有不同程度的作用 ，它能显著提高受精卵在体外发育 至桑椹胚和囊胚的能力 。输卵管为早期珏胎在体外发育提供了一个重要的微环境 有人在 研究输卵管的生理环境时发现了血小板生长固子在输卵管内膜细胞上的结台位点0]，它对 早期胚胎的发育可能有重要作用。 本实验首先测定在无血清条件下，不同浓度的表皮生长因子对牛卵母细胞体外成熟的 影响，以期寻找一个最适浓度 ，然后