白芍总苷对大鼠腹膜纤维化转化生长因子-β1／Smad7信号转导通路的影响.pdfVIP

2014年 1月第31卷第 1期 广州中医药大学学报 January2014，Vo1．31，No．1 Journal ofGuangzhouUniversityofTraditionalChineseMedicine l09 白芍总苷对大鼠腹膜纤维化转化生长因子一131／Smad7信号转导通路的影响 练建红 ， 王书浩 ， 黄家莲2， 汤水福 3 张养 3 潘竞锵 1， 管红斌 2 张玉辉 (1．广州市中医医院，广东广州 510130；2．广东药学院第一附属医院，广东广州 510080； 3．广州中医药大学．广东广州 51o4o5) 摘要： 【目的】探讨 白芍总苷对大鼠腹膜纤维化转化生长因子一131(TGF一3[1)及其信号转导分子7(Smad7)的干预作用及其 机制。方【法】采用42．5g／L含糖透析液+脂多糖法复制腹膜纤维化模型。将sD大鼠随机分成4组：空白组，模型组．白芍 总苷高、低剂量组。第30天后，测定各组腹膜功能，取腹膜组织进行 Masson染色观察腹膜病理学变化．采用实时荧光聚合 酶链反应 (Real—timePCR)方法检测各组腹膜TGF一3[1mRNA、Smad7mRNA的表达。【结果】模型组腹膜厚度显著增加．腹 膜超滤量显著降低 (均PO．05)。白芍总苷高、低剂量组对上述病变均有显著改善作用 (P0．05) 模型组腹膜TGF—B1mRNA、 Smad7mRNA表达水平显著高于空白组 (PO．05或P0．01)，白芍总苷高、低剂量组TGF一3[1表达较模型组均显著降低 (火 0．05)，白芍总苷高剂量组抑制性信号蛋白Smad7则显著升高 (P0．05)。【结论】白芍总苷抑制腹膜组织TGF一131mRNA表达、 上调Smad7mRNA表达可能是其抑制腹膜纤维化的机制之一 关键词 ：白芍总苷／药理学：腹膜纤维化／中药疗法；基因表达调控 ；疾病模型，动物：大鼠 中图分类号 ：R284．5 文献标志码：A 文章编号：1007—3213(2014)0l一0109—04 腹膜透析 (腹透)是三大肾脏替代治疗方法之 (Lippolysaccharides，LPS)，由美国Sigma公司提 一 ． 然而腹膜纤维化所致的超滤功能衰竭导致患者 供 ；一步法 RT—PCR试剂盒 (0neStepSYBR 不得不退出腹膜透析 ．因此．寻找有效的抗腹膜纤 PrimeSeriptPLUSRT—PCRKit)．由宝生物工程 维化的药物是临床研究的重点 中医药对治疗腹膜 (大连)有限公司提供：大鼠TGF一3[1酶联免疫吸 纤维化起着重要作用_l_。目前研究证实：转化生长 附测定 (ELISA)试剂盒，由上海劲马实验设备有 因子一B1(TGF一[31)作为一种强效的致纤维化因 限公司提供 ：NanoDrop2000分光光度计为美国 子，参与了腹膜纤维化的发生和发展[21TGF—B1／ Thermo公司产品：PRISM7500荧光定量PCR仪为 Smads信号通路在腹膜纤维化的过程中发挥了至关 美国ABI公司产品：Centrifuge5424离心机为德国 重要的作用 [ 本研究通过观察不同剂量 白芍总苷 Eppendorf公司产品。 对腹膜纤维化模型大鼠腹膜形态和功能及TGF一[31 1．3 分组及给药 选用健康SPF级SD雄性大鼠 mRNA、Smad7mRNA表达的影响，旨在探讨 白芍 32只，随机分为4组，每组8只，分别为：空白组、 总苷对腹膜纤维化的防治作用及可能机制．现报道 模型组、白芍总苷高剂量组、白芍总苷低剂量组，分 如下 笼饲养 采用高糖+LPS方法复制腹膜纤维化模型4l 空白组每 日腹腔注射生理盐水20mL：模型组每 日 1 材料与方法 腹腔内直接注射 42．5 L含糖透析液 20mL；白芍 1．1 实验动物 健康 SPF级 SD大鼠 (周龄4～6 总苷高、低剂量组每 日腹腔内直接注射42．5 L