蔗糖酯-磷脂脂质体对家兔腹腔巨噬细胞膜磷脂含量的影响.pdfVIP

海南医学院学报 2010，16(2) 136 JournalofHainanMedicalUniversity 蔗糖酯一磷脂脂质体对家兔腹腔 巨噬细胞膜磷脂含量的影响 陈淑芬，钱士匀 ，姚 震，伍 强 (海南医学院附属医院临床中心实验室，海南 海 口 570102) [摘要] 目的：观察蔗糖酯与磷脂组成的脂质体对 巨噬细胞膜磷脂含量变化 的影响。方法：按不同比例 将 乙酸异丁酸蔗糖酯与卵磷脂、鞘磷脂和胆 固醇混合，溶于乙醚中，然后注入 pH 7．2的PBS缓冲液 中， 制成 卵磷脂脂质体及蔗糖酯一卵磷脂脂质体。用肝素沉淀法分离血浆中的 IDI，再用铜诱导法进行氧 化修饰 。将分离纯化的家兔腹腔 巨噬细胞与Ox—IDL共 同孵育 24h后，加入六种脂质体 ，继续孵育 12 ～ 24h；此外，在 Ox—IDI与 巨噬细胞孵育的同时加入脂质体 ，共 同培养 24～36h，结束实验 ，用钼蓝比 色法检测细胞膜磷脂。结果：刚纯化的家兔腹腔 巨噬细胞的膜磷脂含量平均为 (0．429±0．084)rag／百 万个细胞 ，经与 0X—IDI共 同孵育24h后 ，其细胞膜磷脂含量增加到 (0．717±0．045)rag／百万个细胞 (studentt=10．9l19，P0．01)。在 巨噬细胞从 oX_IDI中充分摄取了胆 固醇后 ，加入六种脂质体作 用 12、24h后 ，各组细胞的膜磷脂均低 于荷脂细胞 (或泡沫细胞)的膜磷 脂含量 (F值分别为 2．9252、 7．1916，P0．05)，而与刚纯化的巨噬细胞膜磷脂含量差异无统计学意义(F值分别为 0．3444、0．2 000，P0．05)；巨噬细胞与各种脂质体及 0x—IDI共同孵育24～36h后，经两种卵磷脂脂质体作用过 的细胞的膜磷脂含量高于经四种蔗糖酯一卵磷脂脂质体作用过的细胞，其 中合鞘磷脂的磷脂脂质体 (EPC—I)作用过的细胞 ，膜磷脂含量虽高于四种蔗糖酯脂质体作用过的细胞，但差异无统计学意义(P 0．05)，而不含鞘磷脂的磷脂脂质体 (EPC-II)作用过 的细胞 ，膜磷脂含量不仅 明显 高于四种蔗糖酯脂质 体作用过的细胞 (P0．05)，而且明显高于荷脂的或泡沫化的 巨噬细胞 (t值分别为 3．7629、3．2399，P 0．01)。结论 ：巨噬细胞从 Ox—IDI中摄取胆 固醇的同时，Ox—IDI中的氧化磷脂可能通过弥散作用， 使细胞膜的磷脂含量增高；加入脂质体后 ，可能因细胞膜与脂质体之 间出现 了氧化磷脂的浓度梯度，促 使氧化磷脂向脂质体弥散，从而使细胞膜磷 脂的含量降低 。在脂质体与 巨噬细胞及 Ox—IDI共存的情 况下，膜材与细胞膜组分相近的卵磷脂脂质体，可能通过融合或 ／和吞噬等方式使 细胞的膜磷脂含量增 加；蔗糖酯脂质体可能由于结构差异而不能与细胞膜之间进行类似的磷脂转移。 [关键词]蔗糖酯；磷脂；脂质体 ；膜磷脂含量；肝素沉淀法 [中图分类号]R34 [文献标识码]A [文章编号]1007—1237(2010)02—0136—05 SucroseesterphospholipidIiposomesaffectingthemembrane phosphatidecontentofrabbit peritonealmacrOphages CHEN Shu—fen，QIAN Shi—yun，YAO Zhen，W U Qiang (CentralClinicalLaboratory，AffiliatedHospitalofHainanMedicalUniversity HainanHaikou 570102，China) [FoundatinoProject]：SupportedbyNaturalScienceFoundationofHainanprovince( 30220) [Author]：cHEN Shu： (1966一)，Female，Xinjiang，AssociateResearcher，M．M．Tel： Email：Cs厂 厂66@163．COD1 R P ed：2009—1231 Revised：2010—01一O6 JHMC，2010；16(2)：136—140 [收稿 IEI期]200912-31 [修 回 日期 2010-01-06 [基金项 目]海南省 自然科学基金资助课题 (()．30220