rhG-CSF对健康供者外周血和骨髓免疫特性影响的比较.pdfVIP

rhG-CSF 对健康供者外周血和骨髓免疫特性 影响的比较1 赵翔宇，常英军，黄晓军* （北京大学人民医院 北京大学血液病研究所，北京 100044） 摘 要：目的 探讨rhG-CSF对健康供者外周血采集物（G-PB）和骨髓采集物（G-BM）免疫 学特性影响的异同。方法 用MTT法和夹心酶联免疫复合物（ELISA）法检测G-PB和G-BM中T 淋巴细胞增殖能力和IL-4、IFN-γ的分泌，并用流式细胞仪测定两种移植物的T细胞亚群、 + 树突细胞 （DC）亚群、单核细胞及共刺激分子CD28 的表达。 结果 G-PB中淋巴细胞，CD3 、 + + CD4 、CD8 T细胞和DC1、DC2 以及单核细胞的含量是G-BM的 7～46 倍，CD4/CD8 的比值高于 G-BM（P ＜0.001）。G-PB的T细胞增殖能力高于G-BM（P ＜0.05）；每微升G-PB移植物中T细胞 分泌IFN-γ、IL-4 的量是G-BM的 8.5 倍和 4.5 倍，G-PB中IL-4/IFN-γ比值小于G-BM（P ＜ + + 0.001 ），DC2 与T淋巴细胞的比值也低于G-BM（P ＜0.01），而G-PB中CD4 、CD8 细胞上CD28 P ＜0.001）。 结论 G-PB和G-BM在免疫特性方面的差 表达的百分比和总体表达均高于G-BM （ 别可能是G-PB和G-BM移植后移植物抗宿主病（GVHD）发生率和程度不同的免疫学基础。 关键词：粒细胞集落刺激因子；外周血移植物；骨髓；树突细胞；共刺激分子；免疫低反应 性 我们的实验结果表明与未动员的外周血相比，rhG-CSF体内应用诱导外周血 采集物 （G-PB ）T细胞产生了免疫低反应性、促使Th1 型细胞向Th2 型细胞极化， 并改变了外周血采集物中单核细胞和树突细胞 （DC ）等的免疫组成[1,2] ；随后我 们又以静态的骨髓为对照，研究发现rhG-CSF体内应用同样部分改变了骨髓采集 物（G-BM ）的免疫细胞组成，诱导骨髓移植物T细胞免疫低反应性、促使Th1 [3] 型细胞向Th2 型细胞极化 ；上述研究为G-PB/G-BM混合移植提供了理论依据 [1-5] 。 最近，随机临床研究证实G-BM移植较G-PB移植具有移植物抗宿主病 [6] （GVHD ）发生率低、免疫抑制剂应用期短等优势 。因此，我们推测rhG-CSF 体内应用可能对健康供者外周血采集物和骨髓采集物免疫特性的影响存在差异， 而这些差异的阐明将对干细胞来源的选择和个体化移植的开展具有重要意义。为 此，我们对比了G-PB和G-BM在免疫学特性方面的异同，现报告如下。 材料和方法 材料 标本来自 2003 年 4 月—2003 年 10 月在我院接受异基因造血干细胞移植的 15 名亲缘供者，男 8 名，女 7 名，中位年龄40 岁（13 岁～65 岁）。皮下注射rhG-CSF 5µg/(kg·d)，连续 5d，在第 4d按照我院常规采集骨髓输注给患者，同时留取肝素 1基金项目：教育部博士点基金（20020001086 ） *通讯作者，邮箱：xjhrm@ １ 抗凝的骨髓采集物 10ml，第 5d留取外周血采集物 2ml，各取 0.5ml～1ml行活细 胞免疫荧光标记；用淋巴细胞分离液分离单个核细胞（MNCs ），常规记数，台 盼蓝活细胞染色拒染率在 98% 以上，以含 10%胎牛血清的RPMI1640 （Gibco公司