RNA干涉：沉默基因的机制及应用研究新进展.pdfVIP

维普资讯 国外医学遗传学分册 2002年 第 25卷 第 6期 ·313 · RNA干涉 ：沉默基 因的机制及应用研究新进展 孙秀菊 综述 孙开来 审校 (中国医科大学遗传教研室，辽宁 沈阳 1l0001) 摘要：RNA干涉 (RNA interference，RNAi)是一种 由双链 RNA(double—strandedRNA，dsRNA)始动的序列特异性基因 沉默机制，广泛存在于各种生物，乃至人类。对 RNAi分子机制及生物学意义研究不断深入 ，已发现了许多参与RNAi的基因 和蛋 白质(酶类)，并证 明了RNAi与细胞分化及生物发育密切相关 。同时 RNAi也是一种研究基因表达调控和基 因功能强有 力的工具。本文就 RNAi的分子机制、生物学意义及其应用研究方面的新进展做一介绍。 关键词 ：RNA 干涉 ；基 因沉默 ；发育；基 因调控 中图分类号 ：R394．3；Q753 文献标识码 ：A 文章编号 ：1001—1048(2002)06—0313-04 随着功能基 因组学时代的到来 ，基因表达调控 — — 胚胎死亡 ，然而将通 常用作对照 的有义 RNA 及功能研究己成为生命科学领域的研究热点。代表 注入线虫体 内后 ，却产生 了与反义 RNA 处理完全 基因表达调控的新概念 Epigenetic也应运而生 ，它 相 同的表型 ，这种 出乎意料 的发现引起了另外两位 是指通过非DNA序列改变的其他机制所致 的表型 学者 Fire和 MelloL3的注意 ，1998年他们也观察到 传递 。实质上它包括不 同水平 的基 因表达调控机 有义或反义 RNA单独应用均可 以抑制基 因表达 ， 制。近年来发现 的 RNA 干涉 (RNA interference， 更有意义的是他们将有义和反义 RNA混合物用于 RNAi)现象 即是其 中一种。RNAi是一种 由双链 处理线虫 ，其沉默靶基因的效率约为任意一种链 的 RNA(double—strandedRNA，dsRNA)始动 的序列 十倍 ，随之将这种 dsRNA 抑制基 因表达 的现象称 特异性基因沉默机制 。自从 1995年 [1在秀丽小杆线 为 RNAi。 虫中首次发现 以来 ，人们 已在不同种属的生物 中进 1．2 dsRNA介导 同源 RNA 的降解—— 转录后基 行了广泛而深入 的研究，结果证实 RNAi不仅存在 因沉默 的机制 于秀丽小杆线虫，也存在于昆虫、青蛙、小 鼠、乃至 自从 RNAi发现 以来 ，dsRNA如何高效特异 人类 。RNAi与植物中共抑制 (cosuppression)和真 地沉默细胞 内与其 同源 的基 因成为人们关注 的热 菌 中基因压制 (quelling)的转录后基 因沉默机制密 点。1999年Tuschl等[4将 dsRNA加入已证实存在 切相关 ，是一种古老而又保守的机制 。2001年 12月 RNAi的果蝇胚胎提取物 中，结果发现 dsRNA 被 21日出版 的 《Science》将 RNAi列为 2001年科学十 剪切成 21~23nt的小 RNA，并证实靶 mRNA被降 大突破之一[2]。可见作为基 因表达调控 的重要机 解 ；Hamond等 也证 明，果蝇提取物 中小 RNA介 制 ，RNAi已得到科学界 的认 同和高度重视 。近年来 导靶 mRNA 的降解 。因此提出了RNAi的模式 ：即 对 RNAi分子机制研究不断深入 。已发现 了许多参 dsRNA被处理加工产生 21～23nt的RNA，后者通 与 RNAi的基因和蛋 白质 (酶类)，并证 明了RNAi 过序列互补介导 mRNA 的剪切降解 。 与细胞分化及生物发育密切相关，具有重要 的生物 dsRNA可经多种方式在胞核或胞浆 中产生 ， 学意义 。同时 R