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生物反应工程( 第二版) 戚以政 适合48学时课件 第二章 细胞反应动力学.ppt 62页

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尚辅网 尚辅网 尚辅网 3、产物抑制 乙醇对酵母 尚辅网 4、温度的影响 动物细胞:31~39度 植物细胞:25~30度 最适生长温度、最适生产温度 尚辅网 5、pH的影响 细菌:6.3~7.5 放线菌:7~8 霉菌、酵母:3~6 乳酸菌、乙酸菌 动物细胞:6.5~7.5 植物细胞:5~6 pH的控制 尚辅网 灭菌方法 化学试剂灭菌 射线灭菌 过滤除菌 热灭菌 三、灭菌动力学 尚辅网 对数死亡律(营养细胞) 非对数死亡律(芽孢) 尚辅网 对数死亡律 尚辅网 非对数死亡律 尚辅网 温度的影响 尚辅网 瞬时高温灭菌(UTH) 依据:热死亡活化能>营养物质受热分解活化能 尚辅网 第四节 底物消耗与 产物生成动力学 尚辅网 一、底物消耗动力学 1、仅用于细胞生长 尚辅网 比消耗速率和比生长速率的关系 尚辅网 2、用于细胞生长和维持代谢 最大细胞得率(理论细胞得率) 细胞维持系数 尚辅网 最大细胞得率和实际细胞得率的关系 尚辅网 3、用于细胞生长、维持和产物合成 尚辅网 二、细胞反应中氧的传递 难溶气体 氧的传递的重要性 在常压和25℃时,空气中的氧在纯水中的饱和溶解度为0.25mol/m3 工业发酵常用的微生物的比呼吸速率约为0.1~0.4kg(O2)/[hr?kg(干细胞)] 尚辅网 摄氧率OUR、呼吸强度 尚辅网 三、产物合成动力学 初级代谢产物 次级代谢产物 尚辅网 Gaden模型 相关模型(基质的分解代谢产物,如乙醇、乳酸) 部分相关模型(柠檬酸、氨基酸) 非相关模型(抗生素、微生物毒素) 尚辅网 1、相关模型 产物的生成与细胞生长相关,保持同步。 最大值出现在同一时刻。 尚辅网 2、部分相关模型 当细胞生长达到一定程度后产物开始合成。 尚辅网 3、非相关模型 产物生成与细胞生长无直接联系。 细胞生长时无产物积累。 细胞停止生长后产物开始大量合成。 尚辅网 4、特殊的产物:二氧化碳 呼吸熵(respiratory quotient) 尚辅网 第五节 细胞反应动力学的结构模型 尚辅网 2.5.1 分室模型 尚辅网 2.5.2 控制模型 细胞在消耗某一特定底物进行反应时,必定会存在某一特定的关键酶,它是细胞消耗某一特定底物进行反应的瓶颈。 尚辅网 尚辅网 第六节 描述细胞群体反应动力学 的分离模型 尚辅网 1、描述细胞生理特性变化的分离模型 温度 尚辅网 2、描述细胞形态变异的分离模型 丝状微生物 尚辅网 3、描述重组细胞反应的分离模型 质粒的不稳定性 尚辅网 The End ! * * 尚辅网 生物反应工程 戚以政 王炳武 北京化工大学生命科学与技术学院 尚辅网 第二章 细胞反应动力学 尚辅网 第一节 细胞反应概论 尚辅网 一、发展历史 19世纪以前 1857年Pasteur 一战期间 1933年 1945年 1954年White 自然发酵 酒精发酵由yeast引起 丙酮丁醇、甘油发酵 摇瓶培养法 青霉素发酵 补料操作 尚辅网 二、微生物细胞的性质 尚辅网 三、细胞反应过程的主要特征 反应主体为细胞:催化剂;微型反应器 复杂的酶催化体系 酶催化反应 细胞反应 反应式 机理式 差别 反应过程复杂 经验式 尚辅网 四、模型的简化 真实情况 多相体系(气液固) 细胞多组分 细胞生长不均一 简化模型 均一化模型:细胞和基质均视为液相 均衡生长模型:细胞各组分按相同比率增加 确定论模型:忽略个体差异,取平均值。 尚辅网 第二节 细胞反应计量学 尚辅网 一、细胞浓度的测定 测定细胞数目 测定细胞重量 尚辅网 1、测定细胞数目 比浊法 计数器计数法 活菌平板计数法 尚辅网 比浊法 分光光度计 菌悬液 只适用于颜色浅、悬浮颗粒极少、细胞沉降慢的发酵液。 尚辅网 计数器计数法 显微镜 血球计数器(酵母、霉菌孢子) 细菌计数器(细菌) 活菌数(亚甲基蓝) 不适用于霉菌、放线菌 尚辅网 活菌平板计数法 无菌生理盐水 稀释、涂布 不适用于丝状菌 慢 尚辅网 2、测定细胞重量 细胞干重称量法 细胞堆积容积测量法 细胞组成成分分析法 尚辅网 细胞干重称量法 DCW(dry cell weight) >100度 适用于丝状菌 必须清除发酵液中非细胞固体物质 尚辅网 细胞堆积容积测量法 锥形刻度管 离心 尚辅网 细胞组成成分分析法 蛋白质、DNA、RNA 在细胞中的含量比例不得随时间变化 尚辅网 二、得率系数Y 对基质的细胞得率Yx/s 对基质的产物得率Yp/s 定义式 微分(瞬时)得率系数 宏观(总)得率系数 尚辅网 三、绝对速率和比速率 细胞比生长速率 基质比消耗速率 产物比合成速率 尚辅网 第三节 细胞反应动力学 的非结构模型 尚辅网 一、细胞生长曲线 迟滞期 指数生长期

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