鸡蛋的酯酶多态研究.pdfVIP

算十一巩金国家禽学术讨诧会论太集·青岛 遗传育种 69 鸡蛋的酯酶多态研究 曲湘勇 郭松长 李小平 (湖南农业大学动物科技学院，长沙410128) 摘 要；采用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳法，分析了桃源鸡、雪峰鸟骨鸡蛋黄酯酶 多态现象。研究结果表明蛋黄酯酶多态与血清酯酶多态由同一遗传系统所控制。两个品种中，Es一 且均以Es一18为优势基因，频率分别为78．53％(桃源鸡)、80．17％(雪峰鸟骨鸡)，Es一1‘在两个 群体中频率最低，这为明确两个品种的选育方向提供了理论依据。此外，在桃源鸡中发现了CC纯 合型，而雪峰鸟骨鸡中无Es一1。的纯合现象。 关键词：蛋黄；醋酶；多态性 酶作为催化生物体内代谢途径的高效生物活性物质，是基因的产物之一。生物体内蛋白质(酶)多态现象 (1 982)在总结畜禽血型和蛋白质多样性的研究时认为，这两种遗传标记在估测群体的遗传多样性上极为有 用。研究蛋白质多态性在揭示动植物的种质特性，阐明品种的遗传结构、亲缘关系以及进化历程方面都具有 实用价值，并可为标记辅助选择提供依据，改进动植物生产性状。 酯酶是生物体内发挥重要作用的水解酶类，参与生物体内脂肪的水解与合成。一系列研究表明家鸡体内 究，其中尤以Es一1区研究较多；ShabalinaAT等(1977)经过研究，认为酯酶多态与抗病性有关“；马建岗 性，并推测可能并不存在Es—l。等位基因[53；郭松长(2001)报道酯酶表达还存在组织学差异嘲。 本试验在已有研究的基础上，以我省桃源鸡、乌骨鸡鸡蛋为实验素材，首次对鸡蛋蛋黄酯酶多态现象进 行研究，拟从蛋白质水平上了解两个品种的遗传变异，并分析其等位基因频率，同时为酯酶多态现象提供简 捷可行的检测方法。 1材料与方法 1．1 鸡蛋的收集与样品制备 收集种鸡群同一天产的新鲜鸡蛋，送回实验室。敲开蛋壳，置鸡蛋内容物于已高压灭菌平面皿中，用移液 存备用。 1．2酯酶多态性的检测 完毕后，将凝胶置于染色液中，37c条件下染色，直至出现清晰带纹(染色液组成：30ml0．2M磷酸缓冲渡 70 曲湘勇等鸡蛋的酯酶多态研究 (pH一6．4)+30mg坚固牢蓝RR盐+2mil％a～醋酸萘酯+lml2％口一醋酸萘酯)[7]。显带后的胶片置于 7％醋酸溶液中保存。 裹1 分离胶、浓缩胶配比衰 EDTA--Na 丙烯酰胺贮存液 缓冲踱 1％AP H20 40％蔗糖TEMED —坌曼鉴 !竺!!!!堑些坚!!!：!竺!!!望三!：!!!竺! !：!!竺! !竺! 二 !!生 1．3分型与统计分析方法 第i个等位基因的频率；n表示观测的多态位点数。 2结果与分析 2．I电泳结果 分析电泳图谱及酶型表明；(1)蛋黄中存在酯酶，其亦存在多态现象。经对比发现；蛋黄酯酶由与血清酯 见图1。 围1蕾酶多态电泳圈谱 2．2基因型分布、频率与基因频率 根据电泳、染色结果对Es一1区多态进行分型，统计分析结果见表2。 寰2 蛋黄鹭一Es一1区基因型频率、基因频率 578，两 位基因、存在除CC型纯合子外的5种基因型，对基因型分布进行卡方一差异性检验，得卡方值为8 (1 1“频率居于二者之间。 991)、蒋隽等(1999)报道相符，Es--1。频率最低，Es 2．3平均基因杂合度 760、0．1621，与蒋隽等(1999)报道的 经计算，桃源鸡、雪峰乌骨鸡蛋黄酯酶平均基因杂合度分别为0．1 雪峰乌骨鸡的平均基因杂合度大致相